KLF6和Ki-67蛋白在皮肤黑素瘤中的表达

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背景恶性黑素瘤(malignant melanoma, MM)为痣细胞或黑素细胞的恶性肿瘤,因为其高度恶性、早期血道转移和淋巴道转移以及对化疗和放疗的抵抗,致使其成为皮肤肿瘤中进展快、致死率高的恶性肿瘤之一。除外早期发现和治疗的病例,皮肤恶性黑色素瘤(cutaneous malignant melanoma,CMM)依然是一个进展快速和治疗抵抗的恶性肿瘤,其早期发现和手术切除依然是现在主流的治疗观点。但对于已经发生浸润、转移或手术后发生的浸润转移,患者的预后和生存时间主要取决于病人自身、肿瘤特性以及肿瘤的生物学标志类型。然而,现今的预后判断几乎完全依赖一组有限的临床和组织学特征分析,虽然对本病预后有一些整体上的参考价值,但对更有意义的MM个性化治疗没有直接影响。近年,用肿瘤组织的分子标志预测患者预后的有关研究正在被人们所重视,并已经取得初步的研究结果,即初步认定了恶性黑素瘤患者中最有预后价值的分子标志,它们分别是MCAM/MUC18,MMP-2及Ki67,PCNA和p16/INK4A。KLF6基因,编码Krüppel样因子6(Krüppel-like factor6,KLF6),是一种核转录因子,定位于染色体10P15区域,是该区域发现的第二个肿瘤抑制基因,具有调节细胞发育、分化和增殖,以及加快细胞凋亡并参与细胞衰老调控的重要功能。做为一种肿瘤抑制基因,KLF6基因功能失活在星形细胞瘤、前列腺癌、胃癌、肝癌以及结肠癌中已得到证实,但其在恶性黑素瘤组织中的表达以及在预后判断中的价值文献很少。目前,国外有关恶性黑素瘤中KLF-6与Ki67表达的研究报道仅有少量文献,国内还未见报道。为此,本文采用免疫组织化学SP法,对皮肤恶性黑素瘤及皮内痣组织中KLF-6与Ki67的表达进行初步研究,旨在探讨其在恶性黑素瘤发病机制及细胞增殖中的作用,为恶性黑素瘤的预防、预后分析和治疗靶点的选择提供依据。目的检测KLF-6与Ki-67蛋白在皮肤恶性黑素瘤及皮内痣组织中的表达,探讨其在皮肤恶性黑素瘤发病机制和肿瘤细胞增殖中的作用及意义。材料与方法1.材料来源:原发性皮肤恶性黑素瘤(primary cutaneous malignant melanoma,PCMM)组织标本28例,转移性皮肤恶性黑素瘤(metastatic cutaneous malignantmelanoma, MCMM)17例,皮内痣30例。所有标本均来自于2008年1月至2013年7月间经我院皮肤科、整形外科以及肿瘤科切除的肿瘤组织。入选标准:①所有患者均经过本院病理科病理确诊;②无其它系统恶性肿瘤病史;③首次治疗患者,或在取材前4周内未进行任何形式的化疗及放射治疗者;④本试验设计符合医学伦理学原则。2.方法:所有组织切片常规HE染色,并应用免疫组织化学SP法检测28例PCMM、17例MCMM和30例皮内痣组织中KLF6和Ki-67蛋白的表达。3.统计学分析:数据采用SPSS17.0统计学软件进行分析。计量数据用X±S表示,总体差异用Kruskal-Wallis秩和检验进行分析,采用Bonferroni法进行数据间的两两比较,检验水平α=0.05。结果1. KLF6蛋白在皮肤恶性黑素瘤、皮内痣组织中的表达KLF6蛋白在PCMM、MCMM和皮内痣组织中的阳性率分别为21.43%、17.64%、100%。阳性表达位于细胞浆或和细胞核,呈黄褐色细颗粒或均质状。KLF6在恶性黑素瘤组中为低表达,在皮内痣组中均为高表达,皮肤恶性黑素瘤组与皮内痣组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。PCMM组与MCMM组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。阳性细胞率平均值比较,皮肤恶性黑素瘤组与皮内痣组差异有统计学意义(P<0.05),PCMM组与MCMM组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。2. Ki-67蛋白在皮肤恶性黑素瘤、皮内痣组织中的表达Ki-67蛋白在PCMM组、MCMM组及皮内痣组织中的阳性率分别为100%、100%、6.67%。阳性表达位于细胞核,呈棕褐色。Ki-67蛋白在皮肤恶性黑素瘤组中为高表达,在皮内痣组中为低表达或不表达,皮肤恶性黑素瘤组与皮内痣组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。PCMM组和MCMM组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。阳性细胞率平均值比较,皮肤恶性黑素瘤组与皮内痣组差异有统计学意义(P<0.05),PCMM组与MCMM组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。3. KLF6与Ki-67蛋白表达的相关性KLF6蛋白在恶性黑素瘤组中为低表达,在皮内痣组中为高表达。Ki-67蛋白表达与之相反,二者呈显著负相关(r=-0.368, P<0.01)。结论KLF6蛋白在皮肤恶性黑素瘤组织中低表达;原发性CMM与转移性CMM差异无统计学意义;KLF6蛋白与Ki-67蛋白表达负相关;提示KLF6蛋白低表达与皮肤恶性黑素瘤的形成可能有关。
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