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目的:口腔癌是人体常见的肿瘤之一,治疗难度大,复发率高,预后差。早期预防、早期诊断、早期治疗是降低口腔癌发生率,提高患者生存率,改善患者预后的有效途径。一部分口腔癌来自于口腔癌前病变。对口腔癌前病变的深入研究,尤其是明确其癌变的影响因素,对指导临床实践有着十分重要的意义。口腔黏膜白斑是最常见的口腔癌前病变,其癌变率较高。MicroRNA(miRNA)是一类非编码蛋白质的小分子RNA,具有抑制靶基因表达的功能,可以调节细胞生长、分化、增殖、凋亡等。miRNA异常表达同各种癌症的发生发展密切相关。目前,miRNA在口腔癌前病变的癌变过程中的功能还尚不清楚。因此有必要分析miRNA在白斑癌变过程中的表达变化,寻找特异性miRNA,为后续的靶基因验证和功能分析打下基础。
方法:
1、应用Cox比例风险回归模型分析口腔癌前病交患者癌变的影响因素。
2、应用miRNA芯片获取口腔正常黏膜、白斑、白斑癌变组织的miRNA表达谱。对芯片数据进行分析,筛选出候选的特异性miRNA。
3、应用Real-time PCR对候选miRNA的表达进行验证。
4、应用原位杂交技术探查候选miRNA在口腔正常黏膜、白斑、白斑癌变组织中的定位。
5、利用各种生物信息学方法,预测候选miRNA的靶基因。
结果:
1、高度异常增生患者的癌变风险是低度患者的2.78倍(P=0.002),其它因素未发现有统计学意义。
2、三类组织之间有多个差异表达的miRNA。miR-31和miR-31*是差异性表达较为明显的miRNA。
3、miR-31和miR-31*在白斑癌变组织中表达较高。两者的表达之间呈明显正相关。
4、miR-31和miR-31*在白斑癌变组织中的阳性表达率最高;它们的位置相互接近,部分重叠;而且分布同癌巢、炎症和血管相关。
5、miR-31和miR-31*的预测靶基因数目较多。
结论:
1、上皮异常增生程度是判断患者预后的独立因素。
2、口腔正常黏膜、白斑、白斑癌变组织的miRNA表达谱明显不同。
3、miR-31和miR-31*共同参与了口腔白斑癌变的调节机制。
4、需要进一步验证miR-31和miR-31*在白斑癌变过程中的靶基因,明确相关生物学功能。