蝉蜕是蝉科(Cicadidae)多种蝉的若虫羽化时脱落下的皮壳,为常用中药材。黑蚱蝉Cryptotympana atrata为2015版《中国药典》收载的蝉蜕药材唯一法定基原。近年来,蝉蜕临床应用范围日益扩大,但当前蝉蜕药材品种混乱。据文献记载,除黑蚱蝉外,山蝉Auritibicen flammatus、华南蚱蝉C.mandrina、北京僚蝉Lyristespekinensis、鸣蝉Oncotympana macularicollis、蟪蛄Platypleura kaempferi等昆虫的皮壳在我国多地也作为蝉蜕使用。然而,各品种的物质基础不明确、缺少内在质量一致性评价研究和专属性质量检控方法,制约了蝉蜕药材的资源综合开发利用。为此,本论文对我国多个中药材市场的蝉蜕商品药材的基原进行调查,并对蝉蜕药材化学成分、多基原蝉蜕药材质量一致性、蝉蜕体内吸收代谢和质量标准提升开展了系列研究。具体如下:一、蝉蜕文献综述归纳总结了蝉蜕历史沿革以及资源和品质研究进展,指出目前研究存在的不足,在此基础上提出了本论文的研究思路。二、蝉蜕商品调查基于目前蝉蜕商品存在的问题,走访调查了我国南北中药材市场—安徽亳州中药材市场和四川成都荷花池中药材市场,并收集全国各地56批蝉蜕商品药材,整理、统计蝉蜕药材的市售品种、货源地和规格等情况。调查发现,市售品种除2015版《中国药典》收载的法定品种—黑蚱蝉外,还有山蝉、华南蚱蝉、蟪蛄、北京僚蝉、鸣蝉和焰螓蝉等,且占有较大市场份额;蝉蜕的货源地主要集中在山东、河南、湖南、湖北、安徽、浙江、四川等地。三、蝉蜕化学成分靶向分离纯化蝉蜕中含有特征性的乙酰多巴胺类成分,该类成分具有抗炎、抗氧化和抗肿瘤等活性。分离纯化蝉蜕中主要的乙酰多巴胺类成分,可为后续质量评价研究提供对照物质。使用95%乙醇热回流提取蝉蜕药材,提取物反复经硅胶和ODS柱层析分离纯化,运用UPLC-Q-TOF-MS/MS对不同馏分中的乙酰多巴胺类成分进行实时追踪,发现、锁定目标化合物,采用手性柱和制备液相对目标部位进行手性拆分。最终通过1H-NMR、13C-NMR、UPLC-Q-TOF-MS/MS及UV数据,鉴定了 4个乙酰多巴胺二聚体。四、多基原蝉蜕商品质量评价建立UPLC-Q-TOF-MS/MS方法对7个基原的蝉蜕药材进行全成分表征和半定量研究,探讨多基原、多批次的蝉蜕商品质量一致性。以分离纯化的乙酰多巴胺二聚体作对照品,建立UPLC-Q-TOF-MS/MS分析方法,总结乙酰多巴胺类成分裂解规律,共鉴定了 34个乙酰多巴胺多聚体类成分,包括4个二聚体,11个三聚体,10个四聚体和9个五聚体。再运用建立的UPLC-Q-TOF-MS/MS方法对多批次蝉蜕中2种乙酰多巴胺二聚体进行定量,三聚体、四聚体和五聚体进行半定量分析。结果表明,在7个基原的蝉蜕药材中,焰螓蝉、山蝉和华南蚱蝉的皮壳中乙酰多巴胺多聚体含量与黑蚱蝉相近,且各化学成分组成和比例与黑蚱蝉皮壳相似,提示这3种基原为潜在的蝉蜕药材资源。五、蝉蜕体内吸收代谢研究蝉蜕具有显著药理活性,但经口服进入机体后的吸收、代谢尚未见报道。因此,研究蝉蜕提取物的吸收代谢对于阐明蝉蜕的药理机制、明确发挥药效的物质基础、指导临床合理用药等方面有重要意义。采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对大鼠口服蝉蜕提取物后的血浆、尿液、粪便和胆汁样本进行测定,通过对采集到的色谱、质谱信息与原药材中成分进行比对,推测蝉蜕体内代谢产物可能的化学结构和代谢途径。共鉴定34种原形成分和15种代谢产物,在血浆中检测到5种代谢产物,尿液中检测到3种原形成分和9种代谢产物,粪便中检测到34种原形成分和8种代谢产物,胆汁中检测到2种代谢产物;代谢产物均是以乙酰多巴胺二聚体和乙酰基哌氧环烷为基础的代谢,包括氧化、氢化、甲基化、硫酸化和葡萄糖醛酸化等Ⅰ相和Ⅱ相反应。表明蝉蜕乙酰多巴胺二聚体的代谢产物可以被机体吸收代谢,可能是蝉蜕发挥药效的重要药效物质基础。六、蝉蜕质量标准提升研究前期代谢研究表明乙酰多巴胺二聚体代谢产物能够被吸收代谢,是蝉蜕发挥药效的重要药效物质基础。现版《中国药典》中蝉蜕药材的质控标准缺少定量指标。以乙酰多巴胺二聚体为指标成分,建立HPLC-UV定量分析方法,为蝉蜕质量标准的提升提供参考。首先对提取和液相条件进行系统考察,确定最优条件;方法学考察结果表明建立的定量分析方法稳定、可靠;依据建立的定量方法和含量测定结果,修订了蝉蜕药材质量标准(草案),为《中国药典》蝉蜕药材质量标准的提升提供了依据和方法。