目的:通过观察抗血管生成药物安罗替尼(Anlotnib)对血管内皮细胞(Vasscular endothelial cells,VECs)介导的肿瘤免疫逃逸的影响,揭示血管内皮细胞表达的程序性死亡受体1(Program death receptor 1,PD-L1)蛋白在抗血管生成治疗中的作用和影响。初步探讨安罗替尼对于血管内皮细胞表面PD-L1蛋白表达的影响、及其对肿瘤内免疫细胞分布的影响。方法:收集在天津医科大学肿瘤医院手术后具有完整随访资料的肺腺癌,肠癌和肾癌患者的石蜡切片。使用免疫组化染色(CD34和PD-L1蛋白)来分别标记血管内皮细胞和PD-L1蛋白,研究其在肿瘤组织中的表达量与临床病理特征和预后的相关性,同时使用免疫组化技术检测肿瘤组织中VEGFA和HIF-1α的表达情况和与VECs-PD-L1的相关性。利用Western blot检测(VEGF、缺氧和肿瘤相关培养基)对于人脐静脉内皮细胞(human umbilical endothelial cells,HUVEC)上PD-L1蛋白的影响。Western blot检测多种细胞系(HUVECs,b End.3和MEMRC)中AKT和ERK通路的变化,同时加入Ly294002(AKT通路的抑制剂)和SC-79(AKT通路的活化剂),观察AKT通路对于PD-L1蛋白变化的影响。B16和MC38异种移植瘤小鼠在经过Anlotinib,Bevacizumab或两者治疗后,进行免疫荧光(IF)染色和流式细胞术,以观察CD8~+T细胞和Fox P3~+T细胞在肿瘤组织中的浸润情况。并进行T细胞耗竭实验和瘤内注射过表达PD-L1蛋白的b.End3细胞系实验用于观察VEC-PD-L1对于抗血管生成治疗的影响及肿瘤微环境的影响。结果:免疫组化结果显示肺腺癌,肠癌和肾癌组织中血管内皮细胞上的PD-L1蛋白高表达,并且肺腺癌患者的预后与VECs上PD-L1蛋白的表达有着密切的联系。另外在VECs高表达PD-L1蛋白组中,肿瘤内CD8~+T细胞浸润数目受到抑制而Fox P3~+T细胞浸润数目增多。体外实验显示,在缺氧,VEGF和肿瘤相关培养基刺激下,血管内皮细胞表面PD-L1蛋白表达显著增高,而使用Anlotinib可以显著抑制HUVECs,b End.3和MEMRC细胞表面PD-L1蛋白的表达。Western blot检测发现,Anlotinib可以抑制AKT和ERK通路的磷酸化,但仅使用AKT的抑制剂(Ly294002)时发现PD-L1蛋白的表达受到抑制。在小鼠B16和MC38移植瘤模型中,Anlotnib组较同型对照组相比,显著抑制了肿瘤的组织的增长,改善了CD8/Fox P3比例。同时通过流式和免疫荧光检测发现,Anlotnib显著抑制了血管内皮细胞表面PD-L1蛋白的表达。结论:血管内皮细胞上PD-L1蛋白高表达将抑制肿瘤组织内CD8~+T细胞的浸润,并促进Fox P3~+T细胞聚集到肿瘤组织中,从而成为“免疫抑制性屏障”。Anlotinib可通过下调血管内皮细胞上PD-L1蛋白的表达来改善肿瘤免疫微环境,从而抑制肿瘤的生长。