目的:本课题旨在通过全反式维甲酸(All-Trans Retinoic Acid，ATRA)对人髓系白血病细胞株K562细胞的干预来分析同源盒基因(Homeobox genes，HOX)A5的表达变化及其与凋亡率、细胞周期的关系，探讨HOXA5在髓系白血病发生、发展过程中的作用。为临床治疗白血病提供实验依据。　　方法:　　1.采用肿瘤细胞体外培养技术培养人髓系白血病细胞K562细胞作为实验模型。　　2.细胞增殖-毒性实验(Cell Counting Kit-8，CCK-8):测定用不同浓度的ATRA干预K562细胞24h、48h、72h、96h后，对K562细胞的增殖抑制情况，以确定ATRA干预K562细胞的最佳浓度值。　　3.实验分组:取对数生长期细胞(约105/ml)，将K562细胞随机分为ATRA干预组（实验组）和对照组。实验组设立三个时间亚组，以10.0 umol/L的ATRA分别干预24h、48h和72h;对照组用培养基代替ATRA，其余同ATRA干预组。　　4.流式细胞术检测:测定10.0 umol/L ATRA分别干预K562细胞24h、48h、72h后，各组细胞的凋亡情况。　　5.流式细胞分析仪检测:检测并分析10.0 umol/L ATRA干预K562细胞不同时间后，与相应的对照组相比细胞周期分布的变化。　　6.实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测:测定10.0 umol/LATRA干预K562细胞24h、48h、72h后，细胞中HOXA5mRNA的表达情况，并分析HOXA5mRNA的表达与细胞周期、凋亡的关系。　　7.蛋白免疫印迹(Western blot)法检测:测定10.0 umol/L ATRA干预K562细胞24h、48h、72h后细胞中HOXA5蛋白的表达情况，并分析HOXA5蛋白表达与细胞周期、凋亡的关系。　　8.统计方法分析:将实验结果通过统计学SPSS17.0软件处理，以P＜0.05为差异有统计学意义。两变量间相关性分析采用Spearman等级相关分析检验，a=0.05为显著性检验水准。　　结果:　　1.CCK-8结果显示:ATRA可以抑制K562细胞的增殖，各实验组与对照组相比，OD值的差异有统计学意义(P＜0.05)。ATRA干预浓度为7.5umol/L、10.0 umol/L时，各组细胞在不同时间点的生长趋势最佳。本实验最终选取10.0 umol/L作为干预药物浓度。　　2.流式细胞术检测细胞凋亡率结果显示:实验组细胞凋亡率明显高于对照组(P＜0.05)，且各实验组随着药物干预时间的延长，细胞凋亡率也逐渐增加(P＜0.05)。　　3.流式细胞术检测细胞周期分布显示:ATRA干预K562细胞24h、48h、72h后，G0/G1期比例增高，S期比例降低，细胞增殖周期被阻抑在G0/G1期，细胞增殖受到抑制。　　4.RT-PCR结果显示:K562细胞中可以检测到HOXA5 mRNA的表达，实验组HOXA5 mRNA的表达量较对照组升高(P＜0.05)，且随着干预时间延长各实验组间HOXA5 mRNA的表达量也逐渐增加(P＜0.05)。　　5.Western Blot结果显示:HOXA5蛋白高表达于K562细胞中，ATRA干预组表达量较正常对照组高(P＜0.05)，且随着干预时间的延长HOXA5蛋白的表达量逐渐升高(P＜0.05)。　　6.HOXA5的表达水平与细胞凋亡相关性显示:K562细胞中HOXA5 mRNA及蛋白的表达量与细胞凋亡率的相关性经Spearman等级相关分析显示两者呈正相关。　　7.HOXA5的表达水平与细胞周期相关性显示:HOXA5 mRNA及蛋白的表达量与细胞周期G0/G1期增加百分比呈正相关，与S期降低百分比呈负相关。　　结论:　　1.ATRA干预K562细胞后，细胞中HOXA5 mRNA及蛋白的表达量升高。　　2.ATRA可能通过上调HOXA5 mRNA及蛋白的表达抑制K562细胞增殖，促进细胞凋亡。