【摘 要】
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目的:探索富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)在多囊肾病发病中的作用及相关机制。方法:免疫荧光、原位杂交、Western Blotting观察Cyr61在多囊肾组织、细胞及体液中的表达。构建pcDN
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目的:探索富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)在多囊肾病发病中的作用及相关机制。方法:免疫荧光、原位杂交、Western Blotting观察Cyr61在多囊肾组织、细胞及体液中的表达。构建pcDNA3.1+Cyr61质粒,稳定转染人肾小管上皮细胞(HKC)后进行细胞外基质成分、细胞增殖率和去血清诱导的细胞凋亡指数检测及相关信号蛋白含量检测。构建两个编码Cyr61 RNA干扰序列的质粒,筛选出抑制效果强的siCyr61质粒并转入囊肿衬里上皮细胞中,进行细胞外基质成分、细胞增殖率和去血清诱导的细胞凋亡指数检测及相关信号蛋白含量检测。结果:Cyr61在囊肿衬里上皮细胞内表达显著增高;过表达的Cyr61可增加HKC表达细胞外基质成分,并促进EGF诱导的细胞增殖,抑制去血清诱导的细胞凋亡;利用RNA干扰抑制囊肿衬里上皮细胞内Cyr61蛋白表达,可显著抑制其增殖和表达细胞外基质成分,增强其对去血清诱导的凋亡。Cyr61的促增殖与抗凋亡作用部分通过Erk和Akt途径介导。
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