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研究背景皮肤鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)是表皮或皮肤附属器角质形成细胞异常增殖分化而形成的一种皮肤恶性肿瘤[1,2],在非黑素性皮肤肿瘤中其发病率仅次于基底细胞癌(basal cell carcinoma,BCC),约占20%[3]。该肿瘤主要发生于老年人,好发于头面部、手背等暴光部位,其转移和恶性程度较低,若发展较快或转移则预后较差[2]。近年来,很多研究发现UVB、HPV、化学致癌物、免疫抑制、吸烟、慢性皮肤溃疡以及烧伤疤痕等是SCC的高危因素,然而对于SCC的具体发病机制目前仍未明确[1,4-7]。表观遗传是目前肿瘤领域研究中的热点,它是指在DNA序列未发生变化的情况下基因的表达发生的可遗传性改变,其主要包括染色质重塑、DNA甲基化、组蛋白修饰以及非编码RNA[7]。组蛋白修饰方式主要取决于其氨基末端的改变,主要包括了氨基末端的泛素化、乙酰化、甲基化以及磷酸化等,其中组蛋白甲基化是组蛋白主要的修饰形式之一,它是组蛋白甲基化酶和去甲基化酶动态相互作用的结果。组蛋白去甲基化酶的主要作用位点是组蛋白H3上的赖氨酸4、9、27、36残基。研究表明异常的组蛋白甲基化修饰可导致基因的异常表达,从而引起包括肿瘤在内的多种疾病的发生[8]。近年来研究也证实了组蛋白甲基化与多种恶性肿瘤发生发展密切相关。JMJD2B是组蛋白去甲基化酶JMJD家族成员之一,它可作用于组蛋白H3上被三甲基化的第9赖氨酸残基,使其特异性地去甲基化[9]。以往研究发现JMJD2家族在胃癌、肺癌、乳腺癌、大肠癌中表达显著升高,参与了多种恶性肿瘤的发生[9-12],而该家族与皮肤SCC发生发展的关系目前尚不明确。因此,本课题组欲探讨JMJD2B与SCC的关系,从而为SCC的靶向治疗提供新的方向和理论依据。目的探讨JMJD2B对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株生物学行为的影响及其参与SCC发生发展的相关机制,为SCC的靶向治疗提供新的理论依据。方法1.采用免疫组化和细胞免疫荧光的方法检测JMJD2B在人皮肤鳞状细胞癌组织及A431细胞中的表达;2.转染JMJD2B siRNA至A431细胞株,分别采用CCK-8、克隆形成实验、流式细胞术、Transwell法检测细胞增殖、克隆、周期分布、凋亡、迁移及侵袭情况;3.采用免疫共沉淀法检测JMJD2B与β-catenin、CyclinD1、C-MYC、JUN的相互作用,Western-Blot检测JMJD2B和相关作用蛋白的表达情况。结果1.JMJD2B在肿瘤组织中的表达远高于正常皮肤,并且能同时表达于A431细胞浆和细胞核;2.与未转染组和转染对照组比较,JMJD2BsiRNA转染组细胞增殖、克隆、迁移以及侵袭能力显著受抑,肿瘤细胞发生G1期阻滞,细胞凋亡能力增加(P<0.05),而转染对照组与未转染组差异无统计学意义;3.免疫共沉淀法检测到JMJD2B与β-catenin、CyclinD1、JUN间有相互作用,未能检测到JMJD2B与C-MYC间的相互作用;Western-Blot检测JMJD2B siRNA转染组细胞β-catenin、CyclinD1、JUN蛋白表达显著降低,而转染对照组与未转染组间无显著差异。结论1.JMJD2B在人皮肤鳞状细胞癌组织中呈高表达;2.JMJD2B siRNA能促进A431细胞的凋亡,同时也抑制了肿瘤细胞的增殖、克隆、迁移以及侵袭的能力以及JMJD2B相关作用蛋白的表达;3.JMJD2B与β-catenin、CyclinD1、JUN间有相互作用,特异性地抑制JMJD2B的表达,可以降低其相关作用蛋白的表达。