蓝靛果忍冬组培快繁技术的研究

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蓝靛果忍冬(Lonicera caerulea L. var. edulis Turcz. ex Herd),又名蓝靛果、黑瞎子果、山茄子等,为一种世界珍稀的、纯天然的、绿色的、野生的可食用浆果,药用价值和商用价值很高,素有“第三代果树”之称,其果实富含糖类、有机酸、矿物质、维生素和多种微量元素。国内外对蓝靛果忍冬的研究主要集中在营养成分提取和药理方面,缺乏对人工培育的优良品种和野生资源日益枯竭等蓝靛果忍冬发展问题的研究。本论文把蓝靛果忍冬组培快繁技术与培育新品种结合起来,进行系统的研究工作,以休眠枝条萌发的腋芽为外植体,筛选外植体消毒方法、对其进行组织培养,目的在于探索蓝靛果忍冬离体培养的有效途径,以建立快速高效的繁育体系,提高幼苗繁殖效率、加速育种进程、保护和合理利用蓝靛果忍冬的品种资源、大幅度提高其经济价值和开发价值等方面提供理论基础和技术支持。主要研究结果如下:(1)外植体预处理后,经75%酒精浸泡15~20s,无菌水冲洗3次,再用0.1%氯化汞处理15-20s,无菌水冲洗3次,污染率低于6.33%,死亡率低于8.00%,萌芽率高达85.67%。(2)外源激素及基本培养基种类和浓度对蓝靛果忍冬初代培养的影响:单独使用激素6-BA、IBA、GA3均能诱导腋芽分化,以6-BA2.0mg·L-1的分化效果最好,分化率达92.00%, IBA0.3mg·L-1的分化率达85.33%, GA32.0mg·L-1的分化率达84.00%,单独使用基本培养基均能诱导腋芽分化,以MS的分化率最高,达93.33%;不同种类与浓度的激素和基本培养基正交结果表明,在MS+6-BA2.0mg·L-1+IBA0.3mg·-1+GA31.5·L-1中分化率最高,达95.92%。(3)接种在最佳分化培养基中,30d时分化效果较好,平均苗高达8.43cm,平均干重达0.018g,平均叶面积达0.14cm2,平均分化率达97.85%。(4)继代增殖过程中,由不同种类和浓度的激素、基本培养基的正交试验结果表明,在MS+6-BA2.0mg·L-1+IBA0.3mg·L-1+GA31.5mg·L-1中增殖系数达4.14;继代周期30d为宜,幼苗生长健壮,增殖系数达4.20。(5)外源激素、活性炭及基本培养基种类和浓度对蓝靛果忍冬生根培养的影响:单独使用NAA、IBA均能诱导试管苗生根,以NAA0.2mg·L-1的生根效果最好,生根率达90.67%,活性炭浓度为0.1%时生根率达92%,单独使用基本培养基时,以MS生根效果最好,达89.33%;不同种类与浓度的激素、活性炭和基本培养基的正交结果表明,在MS+NAA0.2mg·L1+活性炭1%中生根率最高,达98.00%。(6)接种在最佳生根培养基中,18~24d生根效果最好,平均苗高达8.43cm,平均根长达3.78cm,平均根数达10条,平均生根率达99.33%。(7)炼苗和移栽过程中,炼苗2d时成活率最高,达92.67%,最适宜的移栽基质为山地土:苔藓=1:1,成活率达94.00%。
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