急性心肌梗死是心血管病中的严重类型,目前仍是全世界死亡和致残的主要原因之一。随着医学的进步,通过静脉溶栓、经皮冠脉介入(percutaneous coronary intervention PCI)和冠状动脉旁路移植术(coronary artery bypass grafting CABG)等治疗方法可使闭塞血管尽早的恢复血流,从而减少梗死面积、改善临床结果。然而,在这些过程中,缺血/再灌注(ischemia/refusion I/R)损伤都是无法回避的问题及难以克服的治疗难点。因此如何减轻I/R损伤逐渐成为了研究热点。I/R损伤的发生机制是复杂的,包括细胞内钙超载、线粒体功能异常、氧化应激、内质网应激、细胞凋亡和自噬的激活等。I/R过程中的凋亡是导致心肌细胞损伤的重要因素之一,因此,减少心肌细胞的凋亡可减轻MI/R损伤。载脂蛋白J(Apolipoprotein-J ApoJ),是一种新型多功能分泌型糖蛋白,广泛存在于人体大部分组织与体液中,参与多种不同的病理生理过程。当心脏受到损伤时,ApoJ可通过高表达减少细胞的凋亡,从而发挥保护细胞的作用。目前针对ApoJ对I/R损伤诱发的心肌细胞损伤影响的研究较少见。本研究旨在检测ApoJ高表达是否能减轻由H/R诱导的心肌细胞损伤,探索ApoJ发挥保护作用的机制。利用携带Apo J基因的重组腺病毒感染乳鼠心肌细胞使ApoJ高表达。利用三气培养箱建立缺氧/复氧(hypoxia reoxygenation H/R)模型,超氧化物歧化酶(superoxyde dismutase SOD)类似物Mn(III)tetrakis(4-benzoic acid)porphyrin chloride(Mn(III)TBAP)和eIF2α去磷酸化抑制剂Salubrinal提前预处理,将心肌细胞分成正常对照组、H/R组、ApoJ组、ApoJ+H/R组、Mn(III)TBAP+H/R组、Salubrinal+H/R组。利用MTT法检测细胞的存活率;ELISA法测定细胞乳酸脱氢酶(LDH)的漏出量、凋亡蛋白酶半胱天冬酶-3/7(caspase-3/7)及细胞内SOD的活性;western blot检测ApoJ、氧化酶Nox2/gp91phox、内质网特异性凋亡蛋白caspase-12、CHOP的表达及真核细胞翻译起始因子2α(eIF2α)的磷酸化水平。ApoJ基因重组腺病毒转染后,心肌细胞ApoJ蛋白高表达。与对照组相比,H/R组细胞存活率和SOD的活性明显下降,LDH的漏出量及caspase-3/7的活性升高,Nox2/gp91phox、caspase-12、CHOP蛋白的表达明显升高,eIF2α的磷酸化水平升高。与H/R组相比,ApoJ高表达组、Mn(III)TBAP组及Salubirnal组LDH的漏出量及caspase-3/7的活性明显降低,ApoJ高表达使细胞存活率和SOD的活性显著升高,Nox2/gp91phox、caspase-12、CHOP蛋白的表达明显下降,而eIF2α的磷酸化水平显著升高。综上所述:1.ApoJ可减少H/R诱导的心肌细胞凋亡,减轻心肌细胞损伤;2.ApoJ具有抗氧化应激作用,通过减轻H/R诱导的氧化应激水平来减轻心肌细胞损伤;3.ApoJ可能是通过PERK/eIF2α信号传导通路来减轻H/R诱导的内质网应激反应,从而减轻心肌细胞损伤。