致病性菌利用多种方式入侵哺乳动物宿主,破坏组织部位,阻碍免疫系统的应答。对于许多细菌性病原体来说,这些策略的一个重要组成部分是通过磷脂膜分泌蛋白质。分泌蛋白在促进细菌毒性方面可以发挥多种作用,从增强对真核细胞的附着到直接使攻击靶细胞并破坏其功能。许多病原体利用专门的蛋白质分泌系统,从细菌的胞浆中分泌毒力因子到宿主细胞或宿主环境中。V型分泌系统（Type V secretion system,T5SS）是这些分泌系统中最简单的一种分泌系统。研究表明T5SS广泛分布于大肠杆菌中,而且在细菌的致病机制中发挥了重要的作用。研究表明T5SS具有多种生物学功能,主要包括对宿主细胞的黏附入侵以及促进细菌的运动性、凝集沉降、生物被膜形成能力、对血清中补体的抗性。本研究通过流行病学调查以及生物学特性分析研究相关的T5SS对APEC的致病机制。1 V型分泌系统（T5SS）在禽致病性大肠杆菌中的分布及流行情况V型分泌系统（Type V secretion system,T5SS）在APEC感染过程中发挥重要作用。为了分析不同致病型大肠杆菌的T5SS在APEC中的分布规律,探讨T5SS与APEC的大肠杆菌进化分群及其他毒力因子的关联性。本文根据大肠杆菌的15个T5SS序列设计特异性引物,采用PCR检测T5SS在APEC临床分离株中的分布,分析APEC菌株的系统进化分群及毒力因子分布,探讨T5SS分布和APEC系统进化分群及毒力因子的相关性。结果显示T5SS在APEC临床分离株中广泛分布,其中ydeK和pplfP的分布率最高,分别为98.55%和92.03%;而upaC和pic的分布率均低于10%。系统进化分群结果显示,APEC主要属于A、B1和D进化分群,B2群较少;T5SS分布和进化分群分析发现ehaA、ehaB、pic、vat在D进化分群APEC菌株中分布率较高,而ehaG、ag43/flu、apaC主要分布于A及B1群APEC中。然而,T5SS和APEC其他毒力基因分布无明显的关联性。所以本研究的结论为T5SS广泛存在于APEC分离株中,且部分T5SS分布与大肠杆菌系统进化分群存在关联性。2 V型分泌系统（T5SS）apaC缺失株构建及其生物学特性分析通过Red同源重组方法构建了禽致病性大肠杆菌APCE的apaC基因缺失株,并且利用互补质粒构建了apaC互补株。然后,比较野生株、缺失株、互补株的生长特性、运动性、生物被膜形成能力、黏附入侵能力、胞内存活能力及致病性的差异,分析ApaC对大肠杆菌生物学特性及毒力的影响。结果发现ApaC不影响大肠杆菌的生长特性以及运动性,但增强了细菌的生物被膜形成能力、凝集沉降能力以及在血清中的存活能力。细胞感染试验表明ApaC促进APEC对细胞的黏附能力及HD11胞内存活能力,,但是抑制入侵能力。动物感染试验发现ApaC在APEC的体内定殖及毒力方面发挥作用结果表明,T5SS ApaC影响APEC的生物学特性以及毒力,为阐明APEC的致病机制提供参考。3 V型分泌系统（T5SS）yjeO基因缺失株构建及其生物学特性分析通过Red同源重组方法及互补质粒构建yejO缺失株及互补株,。并比较野生株、缺失株、互补株的生长特性、运动性、生物被膜形成能力、黏附入侵能力、胞内存活能力及致病性的差异,分析YejO对大肠杆菌生物学特性及毒力的影响。结果发现YejO不影响大肠杆菌的生长特性、运动性以及细菌在血清存活能力,但是促进大肠杆菌生物被膜的形成。细胞感染试验发现YejO促进大肠杆菌的黏附能力,但不影响细胞入侵能力。动物感染试验发现,YejO促进APEC在动物脾脏及肝脏的定殖能力及毒力。结果表明,YejO影响大肠杆菌生物被膜形成、黏附能力及体内定殖能力,在致病机制中发挥了重要作用。