【摘 要】
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本试验以云南黑山羊的Agouti基因序列为模板设计引物,利用黑白两种颜色的山羊基因组作为样品对Agouti基因部分序列进行扩增,获得了Agouti基因的部分序列。根据不同毛色山羊Ag
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本试验以云南黑山羊的Agouti基因序列为模板设计引物,利用黑白两种颜色的山羊基因组作为样品对Agouti基因部分序列进行扩增,获得了Agouti基因的部分序列。根据不同毛色山羊Agouti基因5′非翻译区外显子1剪接体不同类型,设计引物,采用黑白两种颜色的山羊个体进行剪接体验证。试验结果表明:所选山羊个体的剪接体类型均为It It′。山羊基因组序列(登录号:AJPT01136617.1)中有两段序列与牛的预测启动子同源性比较高,因此设计引物扩增目的片段A和B,同时构建两个荧光素酶报告基因质粒PGL3-basic-A和PGL3-basic-B。并用构建的荧光素酶报告基因质粒瞬时转染人皮肤黑素瘤细胞A375(皮肤细胞)和293T细胞(非皮肤细胞)来检测两段目的片段是否具有Agouti基因启动子活性。结果用SPSS19.0软件进行分析,结果表明:所构建的目的片段的质粒与阴性对照相比不存在显著性差异,说明所获得的两段目的片段均不具有启动子活性。
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