急性缺血性脑卒中阴阳类证与血清lncRNA水平的相关性研究

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:fastal
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目的:1、比较急性缺血性脑卒中阳类证、阴类证患者血清lncRNAs的水平并与芯片筛选结果进行比对,寻找与性缺血性脑卒中阴、阳类证相关的特异性lncRNAs,为中医阴阳类证辨证分型提供客观依据。2、比较急性缺血性脑卒中与非急性缺血性脑卒中患者血清lncRNAs的水平并与芯片筛选结果进行比对,进一步将差异表达有统计学意义且与芯片筛选结果一致的lncRNAs与缺血性脑卒中各危险因素进行相关性分析,以探讨lncRNAs可能参与的生物学进程。方法:本研究采用前瞻性非随机对照的研究方法,纳入符合标准于广东省中医院门诊或住院部就诊的急性缺血性脑卒中患者作为病例组,其中又分为阳类证组与阴类证组,同期选择本院脑病中心住院的非急性卒中患者作为对照组。本课题基于我们前期的基因芯片技术筛选外周血差异表达lncRNAs的研究工作,该研究已筛选出急性缺血性脑卒中与非急性缺血性脑卒中,急性缺血性脑卒中阳类证与阴类证中差异表达的lncRNAs,急性缺血性脑卒中与非急性缺血性脑卒中相比共筛选出1023个差异表达的lncRNAs(371个上调,752个下调),急性缺血性脑卒中阳类证与阴类证相比共筛选出3490个差异表达的lncRNAs(1389个上调,2101个下调)。在上述前期研究的基础上,本研究采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法进一步检测各组血清lncRNA的水平,阳类证与阴类证相比,随机筛选出6个差异表达的lncRNA(其中上调3个:uc.167+、ENST00000411561、T072248;下调 3 个:NR 121572、NR 002925、ENST00000596946),急性缺血性脑卒中与非急性缺血性脑卒中相比,随机筛选出6个差异表达的lncRNA(其中上调 3 个:T013651,T131416,T029143;下调 3 个:T072248、ENST00000530525、NR 002925),进行实时荧光定量PCR,比较各组患者血清lncRNA水平的差异。结果:1、本研究纳入急性缺血性脑卒中患者40例作病例组,同时纳入非急性缺血性脑卒中患者40例作为对照组,其中病例组分为阳类证组与阴类证组(分别为10例、30例)。与对照组相比,病例组患者年龄更大、糖尿病患病率更高(P均<0.05),性别及高血压、冠心病、脑卒中、高血脂、吸烟、饮酒等既往史在两组间差异无统计学意义(P均>0.05)。与对照组相比,病例组甘油三酯、低密度脂蛋白、随机血糖、糖化血红蛋白、同型半胱氨酸更高,高密度脂蛋白更低(P均<0.05),胆固醇、血尿酸在两组间差异无统计学意义(P均>0.05)。甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、随机血糖、糖化血红蛋白、同型半胱氨酸、血尿酸在阳类证与阴类证中差异均无统计学意义(P均>0.05)。2、经实时荧光定量PCR结果显示,T072248、ENST00000596946水平在急性缺血性脑卒中患者阳类证与阴类证中血清学水平差异无统计学意义(P均>0.05),阳类证患者血清中uc.167+水平更高,ENST00000411561、NR121572、NR002925水平更低(P均<0.05),其中uc.167-+、NR121572、NR002925、ENST00000596946验证结果与芯片筛选表达趋势一致,ENST00000411561、T072248表达水平趋势与芯片结果不一致。T013651、T029143、T131416、T072248、ENST00000530525、NR002925血清表达水平在病例组与对照组间差异均有统计学意义(P均<0.05),病例组患者血清ENST00000530525、T131416水平较高,T013651、T029143、T072248、NR002925水平较低,其中T131416、T072248、NR002925验证结果与芯片筛选表达趋势一致。3、应用Spearman秩相关分析探讨病例组与对照组中差异表达的经PCR验证有统计学意义且与芯片筛选结果一致的T131416、T072248、NR002925与缺血性脑卒中危险因素的线性相关性。结果显示,T131416与随机血糖、糖化血红蛋白的相关系数分别为0.369、0.254,存在正线性相关(P均<0.05);NR002925与低密度脂蛋白、同型半胱氨酸的相关系数分别为-0.266、-0.257,存在负线性相关(P均<0.05);T072248与各项危险因素均不存在线性相关(P均>0.05)。结论:1、uc.167+在急性缺血性中风阳类证患者中高表达,NR121572、NR002925在急性缺血性中风阳类证患者中低表达,uc.167+、NR-121572、NR002925可能成为急性缺血性中风阴、阳类证辨证分型的客观依据。2、T131416在急性缺血性脑卒中患者中高表达,T072248、NR002925在急性缺血性脑卒中患者中低表达,它们具有一定的疾病预测作用。T131416可能参与人体的糖代谢,促进血糖的升高,在急性缺血性脑卒中的发生中可能起促进作用,NR002925可能参与人体的血脂及同型半胱氨酸代谢,可能抑制急性缺血性脑卒中的发生。
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