【摘 要】
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该研究共分三部分:第一部分髓鞘素的提取与鉴定,采用不连续梯度离心的方法从新鲜牛脊髓中提取髓鞘素,用SDS-PAGE分子量蛋白电泳和致敏豚鼠的方法检测髓鞘素的主要成分和抗原
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该研究共分三部分:第一部分髓鞘素的提取与鉴定,采用不连续梯度离心的方法从新鲜牛脊髓中提取髓鞘素,用SDS-PAGE分子量蛋白电泳和致敏豚鼠的方法检测髓鞘素的主要成分和抗原活性,结果显示,髓鞘素的主要成分为大分子量MBP,并具有很强的抗原活性;第二部分EAE动物模型的制备,以GPSCH为抗原,通过足底皮内注射的方式致敏大鼠,成功地诱导出EAE模型;第三部分口服髓鞘素防治EAE及口服免疫耐受机制的研究,于免疫前7、5、2天、免疫日及免疫后2、5、7天给大鼠口服髓鞘素,口服剂量为5mg/只/次,总量35mg/只,观察动物发病情况,于免疫后第14天(PI14d),将动物全部处死,用RT-PCR半定量法,检测外周淋巴细胞因子的表达情况,同时对中枢神经系统进行常规HE染色、NADPH-d组化染色、原位细胞凋亡检测,所得各项结果分别同对照组比较,并进行统计学处理.口服髓鞘素使大鼠体内Th1型细胞因子表达水平下调,Th2型细胞因子表达水平上调,同时抑制CNS内nNOS活性增加,从而在一定程度上推迟了EAE的发病时间、发病高峰,病情有所缓解,具有一定的预防、治疗作用.但CNS中的细胞凋亡与口服免疫耐受之间,未发现有明确的相关性.
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