褪黑素对大鼠脊髓损伤后PMNL、CINC-1、ICAM-1和IL-1β的影响

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背景与目的脊髓损伤是由多种原因引起的中枢神经系统的损伤,据报道全球每年因脊髓损伤导致自主运动及感觉功能损害的患者在1150万至5340万之间。脊髓损伤可分为原发性损伤和继发性损伤。在脊髓损伤后短时间内由致伤因素直接导致的不可逆性损伤称为原发性损伤。脊髓原发性损伤后,炎性细胞的浸润及炎症因子的产生是引起继发性脊髓损伤的主要因素,由于其具有可逆性,因此控制继发性脊髓损伤是急性脊髓损伤早期治疗的重要目标。褪黑素(MT)是在松果体组织中提取出来的两性分子。有证据表明褪黑素具有神经保护、减少氧化应激、减轻水肿等作用。近年来,中外学者通过不同方法分别探讨了中性粒细胞(PMNL)、白介素-1β(IL-1β)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、中性粒细胞趋化因子-1(CINC-1)等在急性脊髓损伤时的改变,但大多未进行其在褪黑素作用下的研究。本研究在大鼠急性脊髓损伤后给予褪黑素进行干预并观察上述指标的变化,以了解褪黑素的应用对它们是否有影响。材料与方法108只SD大鼠随机分为空白对照组、脊髓损伤组、褪黑素治疗组。每组36只。空白对照组大鼠脊髓不受损伤仅切除T11椎板,而脊髓损伤组、褪黑素治疗组则建立T11脊髓损伤模型。脊髓损伤组、褪黑素治疗组在脊髓损伤后10min分别注射无水乙醇(MT溶剂)和100mg/kg的褪黑素制剂。于脊髓损伤后1h、6 h、12 h、1d、3 d、5 d六个时间点取大鼠脊髓组织,应用化学法测定髓过氧化物酶(MPO)活力变化,应用RT-PCR法观察IL-1β、CINC-1表达情况,用免疫组化SP法观察ICAM-1的表达特点。用SPSS 19.0进行数据分析。计量资料以均数±标准差表示,组间比较采用One-way ANOVA。以P<0.05表示差异具有统计学意义。结果1、空白对照组的大鼠脊髓组织内存在少量IL-1β表达;脊髓损伤组表达大量增加,伤后6h达高峰;褪黑素治疗组脊髓损伤后6h、12h、1d、3d、5d IL-1β表达明显低于脊髓损伤组。2、空白对照组的大鼠脊髓组织内存在少量CINC-1表达;脊髓损伤组CINC-1表达大量增加,伤后12h达高峰;褪黑素治疗组脊髓损伤后6h、12h、1d、3d、5d CINC-1表达明显低于脊髓损伤组。3、空白对照组的大鼠脊髓组织内存在少量ICAM-1表达;脊髓损伤组ICAM-1表达大量增加,伤后12h达高峰;褪黑素治疗组脊髓损伤后6h、12h、1d、3d ICAM-1表达明显低于脊髓损伤组。4、空白对照组的大鼠脊髓组织内MPO活力较低且各时间点无明显变化;脊髓损伤组MPO活力大大增加,伤后1d达高峰;褪黑素治疗组脊髓损伤后6h、12h、1d、3d、5d MPO活力均明显低于脊髓损伤组。结论急性脊髓损伤后,褪黑素可抑制PMNL的浸润,降低CINC-1、ICAM-1、IL-1β的表达,起到减弱脊髓中炎症反应的作用。
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