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研究背景和目的：微小RNA(microRNA, miRNA)是一类对基因进行转录后水平调控的小分子非编码RNA,参与多种生理和病理过程。近来研究表明,某些miRNA具有癌基因或抑癌基因活性,这些miRNA能够通过负性调节其靶基因的表达水平,在肿瘤发生和发展过程中发挥重要作用。研究表明,一些miRNA与人类肿瘤密切相关,直接或间接调控肿瘤的增殖和转移过程。本实验旨在研究miR-20a对卵巢癌OVCAR3细胞生长表型以及转移情况的影响,并确定miR-20a直接作用的靶基因,以阐明miR-20a对卵巢癌发生和发展发挥作用的分子机制。方法：通过反义寡核苷酸技术和RNA干扰技术封闭和过表达miR-20a后,利用MTT实验、集落形成实验和transwell侵袭实验检测封闭和过表达miR-20a对OVCAR3细胞增殖及转移能力的影响。随后,通过半定量RT-PCR、real time PCR和western blot实验验证miR-20a功能受抑制和功能增强后卵巢癌细胞中靶基因APP和CCND1mRNA水平和蛋白水平的变化,进一步在OVCAR3细胞系中验证miR-20a对靶基因的调控作用。最后,利用RNA干扰技术静默靶基因APP和CCND1,从而研究靶基因在OVCAR3中的作用机制。结果：在人卵巢癌上皮细胞系OVCAR3细胞中,封闭内源性miR-20a后,细胞活性基本不受影响,但集落形成能力和细胞的转移能力明显降低。过表达miR-20a后,细胞活性基本不受影响,但集落形成能力和细胞的转移能力明显升高。miR-20a功能受抑制的卵巢癌细胞,APP和CCND1基因的mRNA表达水平有明显升高,APP蛋白表达水平增高。过表达miR-20a功能的卵巢癌细胞,结果则相反。静默靶基因APP和CCND1后,细胞活性不受影响,细胞的增殖能力增强。结论：在人卵巢癌细胞系OVCAR3中,miR-20a通过靶基因APP和CCND1促进卵巢癌细胞OVCAR3的转移。通过反义寡核苷酸技术封闭miR-20a后,能够抑制细胞转移,并缓慢抑制细胞增殖,细胞活性不受影响。通过RNA干扰技术过表达miR-20a后,促进细胞的转移能力和增殖能力,细胞活性不受影响。通过半定量RT-PCR、real time PCR和western blot实验验证miR-20a功能受抑制或功能增强后OVCAR3中APP和CCND1mRNA水平和蛋白水平随之升高或降低,验证了在OVCAR3细胞中APP和CCND1是miR-20a的靶基因。静默靶基因后细胞的增殖能力增强,表明靶基因APP具有抑制细胞增殖的能力,更深一步验证了miR-20a在卵巢癌细胞OVCAR3中的调控作用。