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目的:探讨激素难治性前列腺癌冷冻消融后HGMB1（high mobility group proteinB1，HMGB1）表达的规律，阐明HMGB1对冷冻免疫反应的影响。
方法:复制RM-1细胞激素非依赖性前列腺癌模型，将动物随机分为对照组、冷冻治疗组、EP干预治疗组。利用Endoeare公司氩氦冷冻系统直径1.7mm冷冻器行皮下移植瘤冷冻消融治疗。EP干预治疗组分别于术后12、24小时、48小时分别给予3ml每次EP液腹腔注射。分别于冷冻治疗前、治疗后第1天、第7天、第14天、第21天应用Western blot技术检测HMGB1蛋白在肿瘤局部及脾脏的表达情况，应用流式细胞术检测肿瘤局部、脾脏DC的数量及活化比例，以及肿瘤局部、脾脏DC表面的TOLL-4受体表达情况。
结果:（1）单纯冷冻消融治疗组，冷冻消融术后肿瘤局部及脾脏中HMGB1表达水平于术后第1天开始升高，术后第7天达最高值，后随时间延长于第21天恢复至术前水平，组内比较差异具有统计学意义（P<0.05）；EP干预治疗组术后肿瘤局部及脾脏中HMGB1表达水平于术后第1天开始升高，术后第7天达最高值，后随时间延长于第21天恢复至术前水平，组内比较差异具有统计学意义（P<0.05）；对照组肿瘤局部及脾脏中HMGB1表达水平无明显改变，组内比较差异无统计学意义（P>0.05）。组间比较显示，单纯冷冻消融治疗组，冷冻消融术后肿瘤局部及脾脏中HMGB1表达水平升高幅度明显高于EP干预治疗组（P<0.05）：两组与对照组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。（2）单纯冷冻消融治疗组，冷冻消融术后肿瘤局部及脾脏中DC数量及活化比例于术后第1天开始升高，术后第7天达最高值，后随时间延长于第21天恢复至术前水平，组内比较差异具有统计学意义（P<0.05）；EP干预治疗组术后肿瘤局部及脾脏中DC数量及活化比例于术后第1天开始升高，术后第7天达最高值，后随时间延长于第21天恢复至术前水平组内比较差异具有统计学意义（P<0.05）；对照组肿瘤局部及脾脏中DC数量及活化比例无明显改变，组内比较差异无统计学意义（P>0.05）。组间比较显示，单纯冷冻消融治疗组，冷冻消融术后肿瘤局部及脾脏中DC数量及活化比例升高幅度明显高于EP干预治疗组（P<0.05）；两组与对照组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。（3）单纯冷冻消融治疗组，冷冻消融术后肿瘤局部及脾脏中DC表面TOLL-4受体表达水平于术后第1天开始升高，术后第7天达最高值，后随时间延长于第21天恢复至术前水平，组内比较差异具有统计学意义（P<0.05）；EP干预治疗组术后肿瘤局部及脾脏中DC表面TOLL-4受体表达水平于术后第1天开始升高，术后第7天达最高值，后随时间延长于第21天恢复至术前水平组内比较差异具有统计学意义（P<0.05）：对照组肿瘤局部及脾脏中DC表面TOLL-4受体表达水平无明显改变，组内比较差异无统计学意义（P>0.05）。组间比较显示，单纯冷冻消融治疗组，冷冻消融术后肿瘤局部及脾脏中DC表面TOLL-4受体表达水平升高幅度明显高于EP干预治疗组（P<0.05）；两组与对照组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。（4）相关性分析表明冷冻消融治疗术后肿瘤局部及脾脏HMGB1表达量与DC数量、活化比例及DC表面TOLL-4受体表达量均成高度正相关关系（P<0.001），DC活化比例与DC表面TOLL-4受体表达水平成高度正相关关系（P<0.001）。
结论:冷冻消融治疗导致肿瘤细胞坏死释放HMGB1，同时还可刺激机体进一步产生HMGB1，HMGB1可通过DC表面TOLL-4受体引起肿瘤局部及脾脏DC数量及活化比例明显增加，诱导机体产生特异性抗肿瘤免疫反应；加入HMGB1合成分泌抑制剂EP能够减少冷冻消融后HMGB1表达水平，进而降低DC数量及活化比例，减轻机体产生特异性抗肿瘤免疫反应；HMGB1在冷冻消融治疗后刺激机体产生特异性抗肿瘤免疫反应中发挥重要作用，其表达水平直接影响冷冻免疫反应的强度。