乳糖化修饰纳米基因载体治疗肝癌的前期研究

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目的:制备具有半乳糖基和稳定磁性,能够携带化疗药物的半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒,并对半乳糖白蛋白磁性纳米粒的糖化比率、磁性及药物含量进行检测。方法:将乳糖和白蛋白用还原胺法合成半乳糖基人血白蛋白(galactosylated human serum albumin Gal-HSA);采用滴定水解法制备直径在70nm左右Fe3O4磁性纳米粒。将半乳糖白蛋白、Fe3O4磁性纳米粒及纯盐酸阿霉素按一定的比率混合,通过在精制棉子油中超声乳化、加热固化变性、乙醚洗涤等工艺制备出半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒;用苯酚—硫酸比色法测定半乳糖白蛋白的糖化比率;用乙醇提取法提取半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒中的阿霉素,并用液相色谱仪测定其含量。将纳米粒溶于生理盐水中,并在光学显微镜下观察在磁场的作用下,半乳糖基磁性纳米粒的运动情况,用激光粒度分析仪、原子力显微镜和透射电子显微镜观察纳米粒粒径的大小和内部结构。结果:半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒的糖化比率为32;Fe3O4纳米粒径在70±30nm左右,粒径均匀;阿霉素的含量为58.45ug/g,阿霉素的包含率为97.53%;半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒溶液在光学显微镜下观察,在磁场的作用下,纳米粒迅速向磁铁的方向移动并发生聚集,当磁铁与纳米粒的距离加大时,纳米粒运动速度减慢,并沿磁力线的方向成串珠状聚集。透射电子显微镜下观察Fe3O4颗粒均匀分布在半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒中。结论:半乳糖白蛋白磁性阿霉素磁性纳米粒具有较高糖化比率,稳定的磁性,靶向性强,药物包含率高,释药速率可控制的特点,为靶向药物治疗,提供了可靠的载药工具。
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