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多糖和硒对许多疾病都有防治作用,近年来对多糖和硒的活性的研究已经较为深入,但将多糖与硒有机结合成为硒多糖,在国内外的研究尚处于起步阶段。灵芝硒多糖是一种通过生物转化作用得到的半天然、半人工合成的富硒真菌多糖,硒多糖的化学结构有别于普通多糖,形成了特殊的硒氧键;硒多糖具有多种生理活性,具有可拮抗重金属中毒和抗活性氧损伤的能力,从而发挥其抗氧化作用;影响细胞周期,使癌细胞DNA合成受阻而抑制癌细胞生长:并能够诱导肿瘤细胞凋亡过程的发生等。 本论文通过食用菌深层发酵方法,向灵芝发酵菌丝体发酵液中加入了无机硒—亚硒酸钠,经深层发酵后,有效的将无机硒转化成有机硒并富集于灵芝菌丝体中,热水、碱水浸提得到灵芝硒多糖粗提物。后经去蛋白、脱色、DEAE-cellulose柱层析、高效液相色谱柱层析等步骤,将灵芝粗多糖纯化为10种组分,MTT实验表明,多糖组分SeGLP-2B-1对K562癌细胞抑制率最高。 本论文的着重点是通过对纯化的各多糖组分化学结构的比较,通过分析不同生物活性多糖物质在其化学结构上的差异,从而从化学结构比较的角度为硒多糖的高效生物活性找到证据。本实验的研究对象是富硒多糖SeGLP-2B-1、SeGLP-2B-2和不富硒的灵芝多糖GLP-2B-1、GLP-2B-2,利用红外光谱、紫外光谱、气相色谱、质谱和核磁共振等仪器同步进行结构分析,以求阐明它们在结构上的差异。 高效液相色谱法测定了硒多糖SeGLLP-2B-1和SeGLLP-2B-2的分子量分别为1.06×106D和1.42×104D。 红外光谱分析表明硒多糖中的Se元素可能是以Se=O键或C—O—SeO3键的形式存在。灵芝多糖糖环上的某些部位甲基化具有普遍性,而硒多糖的糖环上的这种甲基化不明显。 紫外光谱扫描结果显示硒多糖在260nm和280nm两处均无明显吸收,说明纯化后的硒多糖已不含核酸和蛋白质。