纳米羟基磷灰石与核糖体相互作用的研究

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纳米羟基磷灰石对癌细胞的抑制作用一直是无机纳米粒子在生物学效应研究一个热点问题。本论文以纳米羟基磷灰石与核糖体的相互作用为主要研究方向,为进一步深入研究纳米羟基磷灰石的抑癌机理奠定基础。本文主要从以下几个方面研究纳米羟基磷灰石的抑癌作用:纳米羟基磷灰石对癌细胞和正常细胞增殖的影响;纳米羟基磷灰石对细胞蛋白质合成的影响;纳米羟基磷灰石与蛋白质、DNA和RNA结合情况;纳米羟基磷灰石与核糖体吸附性分析。通过化学沉降法制备纳米羟基磷灰石粒子,将其与正常细胞和癌细胞作用,分别用MTT法和Alamar Blue荧光法检测纳米羟基磷灰石对这两种细胞增殖的影响。结果表明纳米羟基磷灰石对癌细胞和正常细胞增殖的抑制作用具有显著差异,纳米羟基磷灰石对癌细胞的增殖具有剂量依赖的抑制作用,而对正常细胞无明显抑制作用。使用羟基磷灰石处理细胞后,提取细胞总RNA进行体外表达,在蛋白表达水平上验证了纳米羟基磷灰石对癌细胞蛋白的抑制作用。通过分光光度法研究了纳米羟基磷灰石在体外与牛血清白蛋白、pUC18以及大鼠肝脏总RNA的结合情况,发现不同粒径的纳米羟基磷灰石对蛋白质、DNA、RNA具有不同的结合能力。最后,本研究利用组织匀浆和超速离心得到的大鼠肝核糖体与纳米羟基磷灰石在体外共孵育,检测mRNA与核糖体结合情况,结果表明纳米羟基磷灰石可以较强地与核糖体结合,从而抑制了核糖体与mRNA的结合。本研究通过一系列实验,证实了纳米羟基磷灰石可以作用于细胞中的蛋白质、DNA、RNA,干扰mRNA与核糖体的相互作用,进而影响细胞的蛋白表达水平,并最终对癌细胞的增殖产生显著地抑制作用。
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