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研究背景:化疗(Chemotherapy)是综合治疗胃癌的重要手段,但肿瘤多药耐药(Multidrug Resistance,MDR)限制了化疗药物的进一步应用。研究MDR的发生及影响机制,对指导临床合理化疗有重要的意义。MDR的产生机制较为复杂,其中耐药基因的激活与表达增加,被认为是MDR的主要原因。肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)、谷胱甘肽转移酶‐π( glutathione S transferase pi,GST-π)及葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)是三种常见的多药耐药基因,在胃癌组织或胃癌细胞株中有较高表达,被认为是引起胃癌多药耐药的重要基因。有研究表明,环氧合酶2(cyclooxygenase 2, COX-2)参与肿瘤多药耐药的发生,而选择性COX-2抑制剂(cyclooxygenase 2 inhibitors ,COXIBs)可以增加肿瘤对化疗药物的敏感性,其具体机制尚不清楚。以COX‐2为靶点逆转肿瘤耐药成为目前这一领域的研究热点。目的:研究COX‐2与胃癌耐药基因LRP、GCS、GST‐π在胃癌组织中的表达及其相关性;用选择性COX‐2抑制剂干预胃癌细胞株生长,观察其对胃癌细胞株三种耐药基因表达的影响,探讨COX‐2参与胃癌多药耐药的机制,为临床使用COX‐2抑制剂逆转胃癌耐药提供实验理论依据。方法:收集安徽省立医院2008年6月至2008年10月经外科手术切除并被病理证实的胃腺癌组织标本63例,所有患者术前未接受任何形式的放化疗,并收集同期手术切除并被病理证实的非癌性胃组织30例作为对照,用免疫组化方法观察COX‐2及LRP、GCS、GST‐π在胃癌和非癌性胃组织中的表达情况,并对COX‐2及LRP、GCS、GST‐π在胃癌组织中的表达进行相关性分析;另外,用选择性COX‐2抑制剂塞来昔布干预胃癌细胞株(SGC‐7901)培养,同时不加任何干预措施培养SGC‐7901细胞株作为对照,ELISA法检测各组胃癌细胞株中三种耐药蛋白表达的含量,并用t检验的统计学方法进行分析,研究塞来昔布对胃癌细胞株耐药基因表达的影响。结果:1)胃癌组织免疫组化结果:在胃癌组织中COX‐2、LRP、GST-π及GCS的表达均高于非胃癌组织,其阳性表达率分别为87.3%与36.7%;66.7%与42.9%;63.5%与40.0%;49.2%与23.3%(均P<0.05)。在有淋巴结转移的胃癌组织中COX‐2阳性表达率高于无淋巴结转移的胃癌组织(100%与69.2%,P<0.05),在不同年龄、性别、不同分化程度、不同的癌肿浸润深度组别中COX‐2的阳性表达率无明显差异;LRP、GST‐π、GCS在胃癌组织中的阳性表达率与有无淋巴结转移、年龄、性别、分化程度、不同的侵犯深度等均无明显关系。胃癌组织中COX‐2与LRP(r=0.337 , P = 0.007),COX‐2与GST‐π(r=0.301 , P =0.015),COX‐2与GCS (r=0.394 , P =0.004 )的表达均具有相关性,而LRP与GST‐π(r=0.233, P =0.066),LRP与GCS(r=0.225 ,P =0.077)GST‐π与GCS (r=0.153,P=0.232)的表达则无明显相关性。2)ELISA结果:在正常胃癌细胞株中SGC-7901中LRP、GST-π、GCS三种耐药基因均有表达,其蛋白含量分别为83.76±7.20 ng/ml、41.46±1.85ng/ml、11.56±0.76ng/ ml。经不同剂量的塞来昔布处理胃癌细胞株,与对照组相比: LRP在低、中、高剂量(LD,MD,HD)组的含量均较对照组有明显下降(分别为73.78±6.83 ng/ml,t=2.465,P<0.05;56.95±3.62 ng/ml ,t=8.153,P<0.01;36.49±4.16 ng/ml, P<0.01),MD与LD组的含量相比有明显差别(t=5.330,P<0.01),HD组与LD、MD组含量也有差别(分别t=11.413,P<0.01;t=9.080,P<0.01);GST-π在LD、MD、HD三组的含量也均较对照组有明显下降(分别为36.88±2.50 ng/ml,t=3.610,P<0.01;30.61±1.98 ng/ml ,t=9.821,P<0.01;22.35±2.96ng/ml,P<0.01),MD与LD组的含量相比有所差别(t=4.815,P<0.01),HD组与LD、MD组含量也有明显差别(分别t=9.188,P<0.01;t=5.698,P<0.01);GCS在LD、MD、HD三组的含量也均较对照组有下降(分别为9.60±1.01g/ml,t=3.804,P<0.01;7.75±0.76ng/ml ,t=8.709,P<0.01;6.33±0.87ng/ml,t=11.11,P<0.01,MD与LD组的含量相比有明显差别(t=3.608,P<0.01),HD组与LD、MD组含量的差别也同样具有显著性。(分别t=6.032,P<0.01;t=3.187,P<0.05)。结论:1:LRP、GCS、GST-π在胃癌组织中高表达,是引起胃癌原发性多药耐药的相互独立的耐药基因;2:在胃癌组织中,COX-2与LRP、GCS、GST-π的表达存在正相关;3:塞来昔布可以降低LRP、GCS、GST-π在胃癌细胞株的表达, COX-2可影响LRP、GCS、GST-π在胃癌中的表达并参与胃癌的多药耐药。