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目的:
1.探讨3-硝基丙酸预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。
2.探讨3-硝基丙酸预处理对大鼠局灶性脑缺血半暗带区不同再灌注时间点GLUT1蛋白、GLUT3蛋白和glut1 mRNA、glut3 mRNA基因水平表达的影响。
方法:
1.SD雄性大鼠随机分成2组,每组5只,分别为脑缺血组(I组)和3-NPA预处理组(PI组)。PI组于手术前72h按20mg/kg体重腹腔注射3-NPA。脑缺血120min后,再灌注24h进行TTC染色和大鼠神经缺损体征进行评分。
2.SD雄性大鼠40只,随机分组,分别为:1)假手术组(sham组)4只,只分离颈内、颈外动脉,不做插线处理；2)预处理对照组(3-NPA组)4只,腹腔注射3-NPA(20 mg/kg体重),24h后取组织；3)脑缺血组(M组)16只,脑缺血120min,按再灌注时间(4h、12h、24h及48h)不同又分为四个亚组,每组4只；4)3-NPA预处理组(IPC组)16只,于手术前72h腹腔注射3-NPA(20 mg/kg体重),脑缺血120min,按再灌注时间(4h、12h、24h及48h)不同又分为四个亚组,每组4只。手术后在相应时间点处死大鼠,取缺血侧(左侧)冠状面中间1/3皮质,分别采用Western Blot和RT-PCR方法,检测GLUT1蛋白、GLUT3蛋白和glutl mRNA、glut3 mRNA基因水平表达情况。
结果:
1.PI组比I组脑梗死体积减少8.16％,神经缺损体征减轻(t=2.887,P<0.05)。
2.IPC组比M组的GLUT1蛋白、GLUT3蛋白表达增高,有显著差别(F=5.848,P(0.05；F=6.295,P<0.05),尤以缺血再灌注后48h两者差别最明显。IPC组glut1 mRNA表达在缺血再灌注后4h开始升高,48h最大,显著高于Sham组和M组相应时间点。IPC组glut3 mRNA表达在24h增高,48h最高,与M组相应时间点24h、48h及Sham组比较显著增高。
结论:
1.3-NPA(20mg/kg)腹腔注射,预处理时间窗为72h,大鼠脑梗死体积明显减少,神经缺损明显减轻,具有脑保护作用。
2.3-NPA预处理诱导脑缺血耐受,GLUT1蛋白、GLUT3蛋白和glutl mRNA、glut3mRNA基因水平表达上调,维持脑组织的能量供给是其可能机制之一。