乌骨鸡黑色素氧化降解产物的液相分离及其电喷雾质谱解析

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乌骨鸡的滋补药用价值功效物质基础是乌骨鸡黑色素。现阶段的科学理论研究并未清楚地阐明乌骨鸡黑色素的化学结构。由于黑色素的稳定性,给其结构研究带来不便,采用化学降解法可以获得黑色素的可溶性降解产物。目前,化学降解法是研究黑色素结构的一种方法。本研究采用NaOH-H202化学氧化方法的方法降解乌骨鸡黑色素,打断乌骨鸡黑色素可能具有的聚合结构,以期获得可溶性的小分子降解产物,并对其黑色素降解物进行高效液相色谱法的分离和电喷雾质谱的结构解析,目的在于初步探索乌骨鸡黑色素的结构组成,为进一步研究乌骨鸡黑色素的结构提供科学借鉴和理论参考。本研究的主要内容和结论如下:1.采用NaOH-H202作为乌骨鸡黑色素的降解方法。其方法为:以pH=12 NaOH溶液为反应介质,反应时匀速加入体积分数为3.4%H202,90 ℃反应24 h。,降解产物丙酮上清液的质量含量占降解前黑色素质量数的8%。F样在365 nm紫外下具有荧光,硅胶板薄层显色后发现,F样中存在有机酸,氨基酸及肽类物质。2.在水-乙腈体系的流动相梯度洗脱的条件下,F获得了较好的分离,色谱图上可以看到13个色谱峰,其中4个色谱峰分离较好,并对其4峰组分收集3.采用茚三酮显色实验等证实,4个收集组分均为肽类化合物,其中1、2、4号峰为环肽类化合物,3号为线形肽类。4.通过电喷雾-串联四级杆-飞行时间质谱法获得了乌骨鸡黑色素氧化降解产物的4个收集组分的其精确分子量,分别为452.3355,565.4226,678.5033,791.5896。5.通过对4个收集组分的MS/MS碎片分析,得出4个组分为亮氨酸或异亮氨酸结构单元组成的肽类,1、2、3、4号峰对应的分子式分别为 C24H44N4O4,C30H55N5O5,C36H66N6O6,C42H77N7O7,其基本组成结构单元为C6H11NO。
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