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研究目的探究白介素18(Interleukin-18,IL-18)和炎症小体(inflammasome)在大肠腺瘤性息肉中的表达情况及其临床意义。研究方法(1)选取本院47例明确诊为大肠息肉的患者,根据其病理诊断分为非腺瘤息肉组21例、腺瘤性息肉组26例,对照组为健康体检志愿者20例,根据纳入标准及排除标准,收集入选者的一般资料、新鲜血清标本、肠道黏膜或息肉组织。(2)用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中IL-18、白介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的分泌量,同时检测肠息肉组织裂解液中的IL-1β、IFN-γ表达量。(3)用免疫组化染色(immunohistochemical,IHC)观察各组患者肠息肉组织切片中IL-18、Ki-67的表达水平,并统计Ki-67阳性率。(4)蛋白印迹实验(western blot,WB)检测患者肠息肉组织中IL-1β、炎症小体3(NLR family pyrin domain containing 3,NLRP3)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、凋亡相关的斑点蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、IL-18R的表达量,并对WB结果进行灰度分析。(5)通过实时荧光定量PCR检测各组肠息肉组织裂解液中的IL-18、IL-18R、ASC、IL-18BP、NLRP3、Caspase-1、IL-1β的mRNA分泌水平,比较分析各组患者间上述指标的差异。(6)采用GraphPad Prism7软件进行统计学分析及作图,用Image J进行实验结果分析作图,数据为均数±标准差表示,各组数据间的比较采用T-test检验,p<0.05为差异具有统计学意义。研究结果(1)本实验中大肠息肉发病率在男性明显高于女性,腺瘤性息肉组与非腺瘤息肉组间的性别、年龄、临床症状表现无明显统计学差异。(2)ELISA结果提示腺瘤性息肉患者血清中IL-18表达水平较对照组、非腺瘤息肉组明显上调(p=0.0000001、0.000002),非腺瘤息肉组较对照组血清中的IL-18表达量也有上调(p=0.040);在腺瘤性息肉患者肠息肉组织裂解液中IFN-γ表达量较非腺瘤性息肉组明显上调(p=0.0008),IFN-γ的表达量在对照组与非腺瘤性息肉组、对照组与腺瘤性息肉组无明显差异;IL-1β在三组血清及肠息肉裂解液中的表达均无明显差异。(3)WB图及灰度分析结果提示腺瘤性息肉组的IL-1β、NLRP3、Active-caspase-1的表达较非腺瘤性息肉组的息肉组织、对照组肠粘膜组织中明显上调,而Caspase-1的表达量在对照组、非腺瘤性息肉组、腺瘤性息肉组中逐渐减少,肠息肉裂解液的WB结果还显示IL-18R在腺瘤性息肉患者组比对照组表达明显上调。(4)免疫组化染色显示腺瘤性息肉组的息肉组织中IL-18、Ki-67表达较其他两组明显增强,Ki-67阳性率的统计结果显示腺瘤性息肉组中Ki-67阳性率比非腺瘤性息肉组、对照组均有明显升高。(5)实时荧光定量PCR结果提示IL-18、IL-18R、IL-18BP mRNA的分泌水平在腺瘤性息肉、非腺瘤性息肉、对照组中未见明显差异,另外ASC、NLRP3、IL-1β、Caspase-1的mRNA分泌水平在三组中均无明显统计学差异。结论IL-18、IL-1β、IFN-γ、NLRP3和Caspase-1在腺瘤性息肉患者的血清和(或)肠道息肉组织中表达明显上调,NLRP3炎症通路、ASC-Caspase-1-IL-18/IL-1β通路在腺瘤性息肉形成过程中被激活,提示IL-18、炎症小体在肠道炎性增生性息肉转变腺瘤性息肉过程中可能发挥着重要作用,IL-18和炎症小体可能成为腺瘤性息肉辅助诊断的新的生物标志物。