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目的:鉴定与分析人CD2AP(CD2-associated protein,CD2AP)基因启动子的结构与功能,研究其调控的分子机制,为探讨CD2AP在相关肾脏病发病中的作用积累基础研究。方法:采用5’-RACE法确定人CD2AP基因的转录起始位点,利用PCR进行逐段缺失突变,克隆其5’侧翼DNA序列,构建一系列荧光素酶报告载体,转染人肾小管上皮细胞等细胞系,确定CD2AP启动子的核苷酸范围。利用点突变技术、凝胶迁移率改变试验、染色质免疫沉淀、小RNA干扰和基因过表达等实验,分析CD2AP启动子区的转录因子结合位点。观察过氧化氢(H2O2)模拟氧化应激状态下CD2AP启动子的活性变化,以及血管内皮生长因子对CD2AP启动子活性的影响。转染CD2AP启动子荧光素酶报告质粒至人胚肾293细胞,研究呼吸道合胞病毒感染对CD2AP启动子活性的影响与机制。结果:第一部分:确定人CD2AP基因启动子位于转录起始位点上游-558bp至-1bp之间,一个CREB和两个SP1转录因子结合位点维持其基本转录活性。第二部分:证实在人肾小管上皮细胞中,表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)可以募集AP-1家族的JunD和c-fos成员形成复合体与CD2AP启动子区的一个AP-1样位点(5-TGAGCTCA-3)相结合,激活CD2AP启动子的转录活性,并对血管紧张素Ⅱ诱导的人肾小管上皮细胞凋亡产生拮抗作用。第三部分:证实在氧化应激状态下,CD2AP启动子活性下调,CD2AP与F-actin在细胞内的共定位减少。而低剂量的血管内皮生长因子可以拮抗H2O2诱导的5CD2AP启动子活性下调。第四部分:证实呼吸道合胞病毒感染早期激活CD2AP启动子活性,晚期则抑制其活化。AP-1家族的JunD参与呼吸道合胞病毒感染早期CD2AP启动子的活性调节。而呼吸道合胞病毒感染晚期CD2AP启动子活性的抑制至少部分依赖于RIG-1/MAVS信号的传导。结论:人CD2AP基因启动子位于转录起始位点上游-558至-1bp处,转录因子CREB和SP1维持其基本转录活性。EGF/AP-1/CD2AP启动子是一个促人肾小管上皮细胞生存的信号途径。低剂量的血管内皮生长因子拮抗氧化应激诱导的CD2AP启动子活性下调,可能是其肾脏保护作用的原因之一。呼吸道合胞病毒感染对CD2AP启动子活性的调节有双向作用。呼吸道合胞病毒感染后期造成的CD2AP启动子转录活性显著下调,可能是其产生肾脏损害的机制之一。