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目的:制备树突状细胞(Dendritic Cell,DC)与胶质瘤细胞融合细胞(Dendritoma),并对其形态学及表面标志特点进行观察,为基于DC的融合疫苗研究及应用提供实验基础。
方法:诱导胶质瘤病人外周血来源DC,在聚乙二醇(PEG)作用下将其与胶质瘤细胞融合,利用光镜对其形态学特点进行观察,流式细胞仪分析表面标志(HLA-DR、CD86),通过双荧光标记法检测融合率。
结果:诱导出的DC具有典型形态和免疫表型,DC诱导培养第7天,DC表面HLA-DR表达(75.54±0.726%),CD86表达(61.56±0.273%)。融合细胞在培养体系中占较高比例,细胞融合后体积明显增大,悬浮生长,细胞表面树枝状突起较亲代DC明显短小、稀少。免疫荧染色胶质瘤细胞显红色,DC细胞显绿色,融合细胞显双色荧光为桔黄色。
结论:成功建立Dendritoma的制备方法。Dendritoma细胞保持类似于亲代DC的悬浮生长特性,体积明显增大,具备与两种亲代细胞均不相同的形态学特性,为临床应用Dendritoma疫苗奠定基础。