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目的:(1)研究低氧条件下,吉非替尼能否抑制人非小细胞肺癌细胞A549、HCC827、SK-MES-1的增殖。(2)能否通过提高氧浓度改善人非小细胞肺癌细胞A549、HCC827、SK-MES-1对吉非替尼的敏感性。(3)研究在低氧、常氧、高氧三种不同氧浓度下,吉非替尼对这三种不同的细胞的作用是否有差异。方法:(1)本实验选用三个人非小细胞肺癌细胞株A549、HCC827、SK-MES-1为研究对象,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法测定三株细胞对吉非替尼的敏感性。取处于对数生长期的上述细胞接种于96孔板,加入0μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、60μmol/L的吉非替尼,24小时分别置于低氧(5%)、常氧(21%)、高氧(40%)这三个不同氧浓度下,后加入CCK-8 5μL,通过多通道酶标仪检测各孔的吸光值A(波长=450nm,以波长520nm为参考)。并置倒置显微镜下观察,观察吉非替尼的诱导人非小细胞肺癌细胞凋亡作用。(2)取0μmol/L、40μmol/L吉非替尼作用于处于对数期的A549、HCC827、SK-MES-1三种肺癌细胞,加药后24小时分别置于低氧(5%)、常氧(21%)、高氧(40%)这三个不同氧浓度,收集各组细胞备用。使用流式细胞仪通过Annexin V FITC-PI法测定各组细胞的凋亡率。普通PCR法和半定量RT-PCR法检测各组细胞EGFR、HIF-1α及VEGF-C m RNA的表达。结果:常氧、低氧及高氧条件下,细胞增殖抑制率随吉非替尼浓度的增加、氧浓度的升高而增加(P<0.001)。高氧条件下,与乏氧相关的HIF-1αm RNA在高氧条件下三种细胞均明显减弱(P<0.05),而VEGF-C m RNA、EGFR m RNA在HCC827细胞实验组可见随氧浓度升高表达量下降(P<0.05)。结论:(1)低氧条件下,吉非替尼可以抑制人非小细胞肺癌细胞A549、HCC827、SK-MES-1的增殖。(2)提高氧浓度,人非小细胞肺癌细胞株A549、HCC827、SK-MES-1对吉非替尼的敏感性均提高,且以HCC827细胞株为著。(3)在低氧、常氧、高氧三种不同氧浓度下,吉非替尼对这三种不同的细胞的作用是有差异。可能机制是提高氧浓度可以进一步下调活化的HIF-1αm RNA的表达。