【摘 要】
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目的:1.从新疆维、哈两民族2型糖尿病患者粪样中培养A菌、E菌。2.将A菌、E菌回接到小鼠体内,并探究其对小鼠血糖、血脂的影响。方法:1.收集维吾尔族或哈萨克族2型糖尿病患者
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目的:1.从新疆维、哈两民族2型糖尿病患者粪样中培养A菌、E菌。2.将A菌、E菌回接到小鼠体内,并探究其对小鼠血糖、血脂的影响。方法:1.收集维吾尔族或哈萨克族2型糖尿病患者的粪便样本,分别用A菌和E菌的专属培养基进行培养,进行形态学观察,微量生化反应管进行初步鉴定;提取所得菌株的DNA,并进行特异性扩增,结合全自动细菌鉴定仪对菌株鉴定;2.将A、E菌分别回接小鼠,采用羰花青素染料(CM-Dil)标记法对菌定植力情况进行检测。3.将雄性C57BL/6小鼠按照体重随机分为4组:正常饮食组,正常饮食+A菌组,高脂饮食组,高脂饮食+A菌组,取尾尖血检测随机血糖(GLU)、空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG),进行葡萄糖耐量实验(OGTT)、胰岛素耐量实验(ITT);E菌同A菌一致。结果:1.从新疆维、哈两民族2型糖尿病患者粪样中分离培养A菌,根据细菌鉴定仪及16SrDNA目的片段扩增,获得A菌;E菌传统形态学观察与细菌鉴定手册描述相吻合。2.从小鼠粪便中分离培养后的细菌检测到荧光标记。3.小鼠灌胃A菌3周后,与高脂饮食组比较,高脂饮食+A菌组小鼠体重显著增加;8周后随机血糖、空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯水平升高,差异具有统计学意义(p<0.05,p<0.001,p<0.05);4周后正常饮食+A菌组、高脂饮食+A菌组出现糖耐量异常,OGTT曲线下面积升高;8周后正常饮食+A菌组、高脂饮食+A菌组出现胰岛素耐量异常,ITT曲线下面积升高。4.小鼠灌胃E菌4周后,高脂饮食+E菌组小鼠体重显著增加;8周后随机血糖升高,差异具有统计学意义(p<0.05);第12周,高脂饮食+E菌组小鼠空腹血糖升高,差异具有统计学意义(p<0.001);8周起,高脂饮食+E菌组空腹总胆固醇水平升高,差异具有统计学意义(p<0.001);8周起,正常饮食+E菌组空腹甘油三酯水平升高,差异具有统计学意义(p<0.05);4周起,正常饮食+E菌组、高脂饮食+E菌组出现糖耐量异常,OGTT曲线下面积升高;8周起正常饮食+E菌组出现胰岛素耐量异常,ITT曲线下面积升高;4周起高脂饮食+E菌组出现胰岛素耐量异常,ITT曲线下面积升高。结论:从糖尿病患者粪便中分离的目标菌可定植于小鼠体内,并使小鼠的体重增加;GLU升高,给予菌+高脂饮食小鼠出现糖耐量受损,胰岛素敏感性下降。
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