【摘 要】
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柑橘隶属于被子植物门(Magnoliophyta),双子叶植物纲(Magnoliopsida),无患子目(Sapindales),芸香科(Rutaceae),是深受人们喜爱的水果。橘皮作为柑橘加工过程中的副产品,含有2
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柑橘隶属于被子植物门(Magnoliophyta),双子叶植物纲(Magnoliopsida),无患子目(Sapindales),芸香科(Rutaceae),是深受人们喜爱的水果。橘皮作为柑橘加工过程中的副产品,含有20-30%的果胶,因此橘皮果胶的开发和利用已经成为学者们研究的热点问题。本文对橘皮果胶进行了系统分级及初步结构分析,并对其进行了高温修饰,研究了高温修饰前后多糖结构及体外抗肿瘤活性的变化。根据电荷与分子量的不同,应用DEAE-cellulose离子交换层析、SepharoseCl-6B凝胶层析与Sephadex G-25凝胶层析相结合的方法将橘皮果胶CP进行系统分级,得到两个中性糖级分CPN-H、CPN-L和三个酸性糖级分CPA-0.2、CPA-0.3、CPA-0.4。由于CPN-L为分子量较小的寡糖且含有较多的非糖杂质,本文不做进一步研究。中性糖CPN的分子量约为40KD,通过单糖组成及13CNMR分析得到其结构以线性β-(1,4)连接的聚半乳糖为主。三个酸性糖级分的分子量分别约为85 KD、205 KD和380 KD,它们的单糖组成比较相似,均含有超过84%的GalA,另外还有少量的Rha、Gal及Ara。推测三个酸性糖级分均为含有少量RG结构的HG型果胶。将橘皮果胶的各个级分分别进行两次高温修饰,得到HTCP各级分。除了中性糖级分外,三个酸性糖级分均产生了在235 nm波长处有紫外吸收的小分子物质,并且这种小分子的产量随着高温次数的增多而增大。以CPA-0.3为例,当高温的次数达到13次时,这种小分子的产量达到最高且不再增加,将经过13次高温修饰的CPA-0.3样品命名为HTCPA-0.3-13。HTCPA-0.3-13经过透析分离得到袋内大分子及袋外小分子两个级分。将两个级分分别进行高效凝胶渗透色谱分析,结果表明袋内大分子均一性较好,而袋外小分子仍是混合物。由于该混合物分子量较小且比较接近,很难进一步分离。将袋内大分子与高温修饰前的CPA-0.3分别进行FT-IR和13C NMR分析比较,发现袋内大分子中未酯化的自由羧基较高温修饰前明显减少,推断CPA-0.3在高温修饰的过程中自由的羧基遭到严重破坏。用MTT法检测高温修饰前后CPA-0.3对两种结肠癌细胞HCT-116和HT-29的生长抑制作用,结果表明CPA-0.3对两种结肠癌细胞的生长没有抑制作用,但经过高温修饰后,抑制作用非常明显。
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