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目的:探讨乳腺癌患者外周血、胸水中ALDH1highCD44+CD24-/low细胞的含量及其临床相关性方法:(1)实验标本:①人MCF-7乳腺癌细胞系细胞;②46例乳腺癌患者及12例健康对照组外周静脉血各2ml;③10例乳腺癌患者胸水50ml。(2)实验方法:培养乳腺癌细胞株MCF-7,建立乳腺癌干细胞标志物ALDH1highCD44+CD24low/-流式细胞仪鉴定模型。之后检测乳腺癌患者外周血、胸水中ALDH1highCD44+CD24-/low细胞含量。(3)实验内容:探讨乳腺癌患者外周血、胸水中ALDH1highCD44+CD24-/low细胞含量与临床相关性,及其临床诊断价值。结果:(1)MCF-7乳腺癌细胞系中ALDH1high细胞的表达率在ALDH1反应后直接上机为(67.5±1.3)%,而在ALDH1反应后进一步标记CD24、CD44抗体后为(66.1±1.5)%,两组ALDH1high细胞的表达率差异无统计学意义(P>0.05);CD44+CD24-/low表达率在抗体组(直接标记抗体)为(9.1±1.6)%,ALDH1+抗体组(ALDH1反应后再标记抗体)为(8.9±1.1)%,两组CD44+CD24-/low表达率差异无统计学意义(P>0.05)。(2)外周血ALDH1highCD44+CD24low/-细胞含量在健康对照组、Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期乳腺癌患者中分别为0.00%、0.00%0.04%、0.00%0.13%、0.00%1.45%、0.19%6.80%;Ⅳ期乳腺癌患者外周血中ALDH1highCD44+CD24low/-的细胞含量与其他各组比较,均有统计学意义(P<0.05);而其他各组间比较,均无统计学意义(P>0.05)。(3)10例乳腺癌患者胸水中ALDH1highCD44+CD24low/-细胞所占检测细胞比例为0.14%6.80%,均数为2.56%,其与ER及HER-2表达情况之间均无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)成功建立了用流式细胞仪进行ALDH1highCD44+CD24-/low细胞的检测方案。在ALDH1反应后进一步标记抗体的情况下,不影响ALDH1high细胞的检测结果;ALDH1反应亦没有影响进一步标记抗体的检测结果。(2) 11例Ⅳ期乳腺癌患者外周血中可检测出ALDH1highCD44+CD24low/-细胞,其中4例明显呈群分布。因此,检测外周血中ALDH1highCD44+CD24low/-细胞含量的方法,有可能会成为一项非常有价值的、可以判断临床诊断、治疗效果的新型指标。(3) ALDH1highCD44+CD24low/-细胞可能是不同的乳腺癌基因亚型的共同的乳腺癌干细胞。