恶性疟原虫海南株var基因的序列测定及分析

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疟疾是一种流行广泛,对人类危害最为严重的重要传染病之一。随着蚊虫对杀虫剂及疟原虫对各种治疗药物的抗性的不断增加,且缺乏有效地预防疫苗,防治形势一直很严峻。疟原虫复杂的形态特征变化和不断地抗原变异能力是抗疟疾疫苗研制的巨大挑战。为了解恶性疟原虫海南株主要抗原变异基因(var基因)的组成和功能特征,本研究首次对海南株var基因进行了序列测定及系统进化分析,获得56个不同的var基因序列,并在GenBank上注册,注册号为FJ748609~FJ748664。系统进化树显示,海南株与标准株3D7株(非洲)的var基因组成相似。Var2CSA是var基因中的一个特殊基因,该基因的序列与其它var基因相比差异很大且最为保守,扩增该基因的全序列发现恶性疟原虫海南株含有两个不同的var2CSA基因,分别为10429bp、10444bp,而其它地区分离株除HB3株外仅有一个该基因,序列分析表明,这两个基因的蛋白质序列含有跨膜区,且具有明显的亲水区,抗原表位优势很高。比对发现海南株var2CSA与3D7株有较高的同源性;系统进化树显示海南株与3D7株和DD2株的进化地位较近。本试验还对海南株HN(2)和3D7株var2CSA基因的DBL5-ε和DBL6-ε区域进行了体外表达,利用ELISA方法初步鉴定重组蛋白质与相关受体的黏附特点,结果显示这两个区域均能与胎盘内的CSA受体及人IgG受体结合,且DBL5-ε区与受体的亲和力高于DBL6-ε区域。本实验从分子水平上了解恶性疟原虫海南株的遗传变异特征,并对致病功能区做了初步鉴定,为破解其分子致病机制及研发抗妊娠相关性疟疾疫苗提供了理论基础。
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