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背景:过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome-proliferators-activated receptors,PPARs)共包含PPARα、PPARδ、PPARγ三个成员。作为PPARs家族成员之一,PPARδ在调控炎症、代谢、肿瘤发生等方面发挥重要的作用,然而PPARδ转录后修饰对肿瘤进展的影响目前依然不清楚。大量研究表明表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)异常表达或激活促进肿瘤发生。EGFR属于酪氨酸激酶,我们课题组前期研究表明,EGFR能诱导PPARγ磷酸化,从而抑制PPARγ抗肿瘤功能,该研究显示EGFR能诱导底物磷酸化,从而改变其功能。然而EGFR与PPARδ相关性及其作用机制目前不是很清楚。方法:利用免疫共沉淀、Western blot分析相关蛋白的表达以及PPARδ与EGFR相关性;利用液相色谱-串联质谱法鉴定EGFR诱导PPARδ磷酸化位点;随后进一步利用体外磷酸化方法确定EGFR诱导PPARδ-Y108位点磷酸化;利用双荧光报告分析PPARδ活力,及其下游代谢相关基因SLC1A5和Glut1转录活力;利用qPCR分析相关基因的表达水平;利用软琼脂糖集落形成实验分析PPARδ-Y108磷酸化对肿瘤细胞增生的影响;利用移植瘤肿瘤模型分析PPARδ-Y108磷酸化对肿瘤生长的影响;利用MTT方法分析细胞存活。结果:利用序列比对分析发现PPARδ包含一个能被EGFR磷酸化的结构域。液相色谱-串联质谱法分析表明,活化的EGFR诱导PPARδ-Y108位点磷酸化。进一步分析发现,虽然活化的EGFR能诱导PPARδ-Y108位点磷酸化,但是PPARδ-Y108A突变体显著抑制这一现象。双荧光报告分析表明,与野生型PPARδ相比,PPARδ-Y108A突变体显著降低PPARδ转录活力。进一步分析发现,过表达PPARδ增强Glut1,SLC1A5基因转录、蛋白表达,以及增加肿瘤细胞葡萄糖消耗、乳酸释放、谷氨酰胺摄入,然而PPARδ-Y108A突变体显著抑制这一现象。软琼脂糖集落形成实验分析表明,PPARδ促进肿瘤细胞增生,然而PPARδ-Y108A突变体显著抑制这一现象。移植瘤肿瘤模型分析表明,PPARδ促进肿瘤生长,然而PPARδ-Y108A突变体显著抑制这一现象。利用MTT分析表明,与PPARδ-Y108A突变体相比,过表达PPARδ显著增加肿瘤细胞对化疗药物(Camptothecin,Cisplatin,Taxol,Etoposide)的抗性。结论:EGFR诱导PPARδ-Y108位点磷酸化,从而增强了PPARδ活力,进而促进PPARδ介导Glut1和SLC1A5基因转录、蛋白表达,随后增加肿瘤细胞葡萄糖消耗、氨基酸的摄入,最终促进肿瘤生长及增强肿瘤细胞化疗抗性。