背景:一种脂肪来源的成体干细胞,被称作脂肪组织源性间充质干细胞（adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells,ADMSCs）,具有分化为心肌、内皮、神经等多种组织的潜能。人体脂肪组织来源丰富,而且能从抽脂术中废弃的脂肪中获取,损伤小,患者易接受,因而容易分离得到大量的ADMSCs。因此,ADMSCs作为种子细胞有希望进行心肌等组织再生的治疗。2007年1月,西班牙在世界上首次将从腹部脂肪中提取的成人干细胞经导管移植到患者心脏中,进行针对心绞痛和心脏病的试验性治疗。但目前国内对其治疗心血管疾病相关机制的基础研究还很有限,限制了其临床应用。我国是中医中药的发祥地,具有丰富的中医药资源,本研究尝试使用中药成分改善ADMSCs移植后的转化率及存活率,为中医药在心肌梗死及心力衰竭防治上的应用开辟新的研究领域。地黄低聚糖（Rehmannia glutinosa oligosaccharide,RGO）系从地黄中提取的地黄多糖中进一步分离提取的有效成分,分子量为1000-3000,由60%的四糖和20%的三糖为主要成分构成。本研究旨在观察地黄低聚糖对脂肪源性间充质干细胞增殖、抗凋亡保护作用及旁分泌作用的影响,为RGO应用于促进ADMSCs移植效率提供实验依据。目的:一是观察RGO对ADMSCs增殖的影响;二是观察RGO对过氧化氢诱导的ADMSCs凋亡的保护作用;三是观察RGO对ADMSCs分泌VEGF和HGF的影响。内容和方法:根据以上目的,本研究分为三个部分:第一部分从腹部外科手术患者术后废弃的脂肪组织中分离、培养、鉴定人ADMSCs,免疫组织化学方法鉴定其表面分子CD44、CD105、CD45、CD34的表达,应用不同浓度的地黄低聚糖IMDM（0、1mg/L、10mg/L、100mg/L、400mg/L）体外培养hADMSCs,应用MTT比色法检测RGO对ADMSCs增殖能力的影响。第二部分将分离、培养的ADMSCs随机分成3组:正常对照组（N组）,无特殊处理;H₂O₂组（H组）,加入终浓度0.1 mmol/L的H₂O₂;地黄低聚糖+H₂O₂组（R组）,加入终浓度0.2g/L的地黄低聚糖和终浓度0.1 mmol/L的H₂O₂。三组干预时间分别设为1、6、24h,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,观察RGO对ADMSCs抗H₂O₂诱导的细胞凋亡的影响。第三部分应用不同浓度的地黄低聚糖IMDM（0、1mg/L、10mg/L、100mg/L、400mg/L）体外分别培养ADMSCs,培养72 h后,用ELISA法测定不同培养基中VEGF和HGF的含量。结果:培养的ADMSCsCD44、CD105细胞免疫化学结果为阳性,而CD34、CD45均为阴性。MTT结果示,与对照组相比,1mg/L组及10mg/L组RGO对人脂肪源性间充质干细胞的生长均无明显促进作用（P＞0.05）,100mg/L组RGO对人脂肪源性间充质干细胞的生长呈显著的促进作用（P＜0.01）,400mg/L组RGO对人脂肪源性间充质干细胞的生长亦有明显的促进作用（P＜0.01）。100mg/L组与400mg/L组相比,二者对hADMSCs的促进作用亦有明显差别,100mg/L组对增殖的促进作用明显优于400mg/L组（P＜0.05）。干预1,6和24h后,H组较N组凋亡率均显著升高（P＜0.01）,1、6和24h后,R组较H组细胞凋亡率均显著降低（P＜0.01）,即RGO减少了H₂O₂诱导的人脂肪源性间充质干细胞凋亡。将ADMSCs培养72 h后,100mg/L组与400mg/L组的VEGF和HGF含量明显升高（P＜0.01）,且100mg/L组较400mg/L组升高明显（P＜0.05）。根据细胞群体的倍增时间计算培养72h后各组细胞的数量,并计算每1×10⁵细胞上清液中VEGF和HGF的含量,结果各组间比较无统计学差异。结论:1、一定浓度的地黄低聚糖对hADMSCs的增殖能力具有促进作用。2、地黄低聚糖可减轻H₂O₂诱导的人脂肪源性间充质干细胞凋亡。3、一定浓度的RGO（100及400 mg/L）除可促进ADMSCs增殖外,还可促其分泌VEGF和HGF。但RGO增加其分泌VEGF和HGF的机制可能并非直接促进作用,而是通过促进ADMSCs的增殖间接引起VEGF和HGF的分泌增加。