论文部分内容阅读
目的研究P38MAPK抑制剂SB203580在人肝癌细胞系HepG2细胞缺氧再灌注过程中细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡能力的作用，以及在人正常细胞系LO2细胞缺氧再灌注过程中细胞增殖和凋亡能力的作用。方法1，四甲基偶氮唑蓝比色（MTT）法测定不同药物浓度及缺氧时间该药物对HepG2细胞及LO2细胞增殖的影响；2，分别使用0.5μmol/L和0.1μmol/L的SB203580培养HepG2细胞及LO2细胞，Annexin V-FITC/PI双染实验检测细胞凋亡率的变化。3，分别应用Western Blot、划痕实验、Transwell实验检测HepG2细胞中P38蛋白表达情况和细胞迁移、侵袭的变化。结果与正常培养细胞组相比，缺氧培养组HepG2细胞的凋亡率、P38MAPK磷酸化水平增加；SB203580+缺氧培养组HepG2细胞的凋亡率相对于缺氧培养组增加，P38MAPK磷酸化水平降低；划痕实验48h后，缺氧对照组HepG2细胞明显向划痕的中央迁移，而SB203580+缺氧培养组HepG2细胞迁移受到抑制;侵袭实验24h后，SB203580+缺氧培养组HepG2细胞的侵袭能力较缺氧对照组降低(P <0.05);AnnexinV-FITC/PI双染实验显示与缺氧对照组相比，LO2细胞SB203580+缺氧培养组凋亡率降低，而HepG2细胞SB203580+缺氧培养组凋亡率则增加(P<0.01)；MTT结果显示实验组HepG2细胞和LO2细胞增殖抑制率受到影响，并出现时间浓度依赖关系。结论SB203580通过特异性阻断P38MAPK信号转导通路，对缺氧培养的正常肝细胞LO2细胞产生保护作用，同时对缺氧培养的肝癌细胞HepG2细胞具有促进凋亡、抑制增殖以及抑制细胞迁移和降低侵袭能力的作用。