酶固定化技术是指通过物理或化学方法将酶固定于合适的载体上,便于其与反应物分离,并重复使用的一种技术。本文采用石英砂为载体,研究通过共价键结合法在其表面固定辣根过氧化物酶(HRP),对固定化酶的理化性质、稳定性等进行表征,并将所得固定化酶应用于双酚A的去除和染料脱色。本论文主要进行了以下方面的研究。探索了用壳聚糖对石英砂载体进行预处理的方法。石英砂先用2%的壳聚糖浸泡,然后用2%的戊二醛溶液交联,可在表面覆盖一层稳定壳聚糖膜,上面带有胺基,为共价键交联酶蛋白创造条件。壳聚糖预处理载体负载HRP的最佳条件为：HRP浓度0.1mg/mL,交联剂戊二醛浓度0.1%,温度4℃,pH4.5反应时间3小时。该条件得固定化酶的活性回收率达到6.23%,平均每克载体载酶量为1.18U。对固定化酶的最适pH、热稳定性、贮存稳定性、循环使用性等方面进行了研究。结果表明固定化酶的最适pH较游离酶有所降低,从5.0降为4.5,固定化酶在酸性条件下的活性要明显高于游离酶；固定化酶比游离酶表现出更宽的温度适应范围,固定化酶在60℃能保持50%以上的酶活性,而游离酶在60℃酶活性仅为原来30%；固定化酶贮存10天后相对酶活力仍保持在90%,而游离酶仅保持83%；固定化酶循环使用5次后,酶活性降为原来20%左右。对固定化酶进行了BPA污水处理的研究。结果表明相同酶活性单位的固定化酶降解效果比游离酶要好,在3h内,固定化酶对BPA的降解率为55%,游离酶为25%。对固定化酶进行了甲基橙染料脱色的研究。结果表明,反应最适pH为4,随pH增加,脱色率逐渐降低；固定化酶首次使用脱色率接近50%,重复使用三次后,脱色率只有20%,说明固定化酶重复使用性有待于进一步提高。