目的:血友病性骨关节病（HA）是一种特殊类型的关节疾病,目前仍缺乏有效的治疗方案,现有治疗手段主要包括早期凝血因子替代或者终末期全膝关节置换。针对HA具体发病机制的研究目前尚处于探索阶段,以往研究结论认为HA与骨关节炎（OA）等退行性关节疾病具有共同特征;与此同时,多项最新研究结果显示OA进展过程中存在铁死亡现象,谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）是OA软骨细胞发生铁死亡的重要调节因子。相较于OA,HA的关节腔内含铁血黄素沉积、炎症反应更为剧烈,发生铁死亡的条件更为明显,故本实验拟从铁死亡方向对HA软骨退变进行初步探讨。方法:选取安徽医科大学第二附属医院院行全膝关节置换手术的HA和OA患者各10名,收集术中所得胫骨平台标本以获取软骨样本;另外选择7名因严重外伤接受膝上截肢的患者同一部位软骨作为对照（Control）。Control组、OA组和HA组软骨的具体收集和处理方法依据根据具体实验类型不同进行针对性取样。通过H＆E染色、Perls染色观察软骨组织结构特点、形态学表现及铁沉积情况;采用WB检测ADAMTS5、Collagen II、MMP3、MMP13软骨组织退变相关蛋白的表达水平;利用q RT-PCR和WB检测软骨组织ACLS4、GPX4、P53、SLC7A11、SLC40A1等铁死亡相关基因m RNA及蛋白表达水平;使用番红O-固绿法染色软骨组织以分辨软骨基质分布,并采用国际骨关节炎研究协会（OARSI）评分评估骨性关节炎的进展;IHC技术被用于在软骨组织中定位和定性GPX4和Collagen II表达,前者可检测软骨细胞铁死亡水平,后者则反映软骨组织退变程度;最后,通过透射电镜观察软骨细胞是否发生铁死亡的特征性微观改变。结果:软骨组织H＆E染色结果显示OA和HA组软骨均呈退行性改变,但HA组软骨具有明显的炎症细胞浸润现象;Perls染色结果显示三组均无明显铁沉积现象。于Control组和OA组相比,HA组ADAMTS5、MMP3、MMP13三种软骨组织退变相关蛋白表达水平升高（P<0.05）,Collagen II蛋白表达水平降低（P<0.05）;ACLS4、P53等铁死亡相关基因m RNA及蛋白表达水平升高（P<0.05）,GPX4、SLC7A11、SLC40A1等铁死亡相关基因m RNA及蛋白表达水平降低（P<0.05）,呈明显铁死亡趋势;番红O-固绿染色示HA组软骨基质分布混乱且关节炎进展在三组之中最为迅速;IHC结果显示HA组GPX4和Collagen II表达均降低（P<0.05）;最后,透射电镜结果显示HA软骨细胞内质网肿胀扩张、线粒体变性且存在线粒体嵴断裂表现。结论:以上这些结果显示:HA软骨退变过程中可能存在铁死亡,HA软骨细胞铁死亡和ECM降解之间的关联有待细胞和动物模型验证。软骨细胞铁死亡可能是HA的发病机制之一,通过抑制软骨细胞铁死亡来治疗血友病性骨关节病有望成为该病的新疗法。