本实验室高友菲利用酵母单杂交技术筛选到了自贡冬豆中新型MYB转录因子GmMYB173,初步揭示了GmMYB173在大豆开花发育中可能发挥调控作用。本课题通过进行GmMYB173的表达特性分析、亚细胞定位分析、转基因功能分析等,初步阐释Gm MYB173的分子功能,探索其在大豆开花调控中功能及其调节机制,有助于后续深入研究其在大豆生长发育中的作用奠定基础。主要研究方法及结果如下:1.分析发现GmMYB173含一个MYB结构域,属于R1/R2-MYB类转录因子;亚细胞定位预测于核中;无信号肽;氨基酸序列中含14-3-3蛋白结合位点。2.基于基因枪介导的洋葱表皮细胞转化法和PEG/CaCl2介导的拟南芥原生质体转化法的亚细胞定位分析结果均表明其定位于细胞核中,与预测结果一致;同时,GmMYB173在缺失14-3-3蛋白多肽域之后失去核表达特异性,意味着14-3-3蛋白可能通过此多肽域影响GmMYB173的细胞核定位进而调控其功能。3.酵母双杂交分析表明GmMYB173与目前大豆中检测到转录表达的所有16种14-3-3蛋白均存在互作,但互作强度各不相同,其中GmSGF14n互作强度最高,这一方面表明在植物体中可能是Gm SGF14n与其结合从而调控靶基因的功能,另一方面也说明植物有可能通过不同14-3-3蛋白实现对其的精准调控。4.表达特性分析:利用RT-PCR分析方法发现GmMYB173在叶片表达量较高,这与其潜在调控对象GmFT2a在叶片中表达特性一致;同时其对ABA和干旱存在不同程度的响应,且在含有5%甘露醇的培养基中,GmMYB173转基因发状根生长较对照生长情况好,表明GmMYB173参与大豆对于逆境胁迫的响应。5.转基因功能分析:转基因拟南芥实验表明GmMYB173的异源表达长日条件下引起了拟南芥早花,且开花促进基因FT和SOC1的表达量上调;发状根系统分析发现GmMYB173的过表达促进了GmFT2a和GmFT5a的表达,暗示其在大豆中的过表达可能引起植株的早花;通过农杆菌介导的转化获得了GmMYB173的转基因T1代自贡冬豆植株,通过对其表型观察,猜测GmMYB173可能是通过缩短植株的营养生长时期从而促进植株的早花。