信号转导与转录活化因子Stat5介导针刺止痒作用机制

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目的:1、明确信号转导与转录活化因子Stat5与瘙痒的关系;2、明确针刺止痒与Stat5的关系;方法:选用以Balb/c为背景品系的野生型Stat5 ff小鼠及中枢条件性基因敲除Stat5 ffcre小鼠各12只,8-10周龄,体重20-25g,随机分为Stat5 ff组胺组、Stat5ff Compound48/80组、Stat5 ff氯喹组、Stat5 ffcre组胺组、Stat5 ffcre Compound48/80、Stat5 ffcre氯喹组,共6组,每组4只。通过颈背部皮下注射组胺、Compound48/80、氯喹等3种致敏物质后,每隔10分钟观察并记录小鼠的搔抓次数,连续观察30分钟,评价Stat5与瘙痒的关系。选用健康清洁级Babl/C小鼠,雄性,10周龄,体重20±2g,采用随机数字表法将小鼠随机分为空白组、生理盐水组、组胺模型组、模型加2Hz电针组(简称模针组)、2Hz电针组、假针刺组,共6组,每组8只。预先分别给予生理盐水组、模针组、2Hz电针组、假针刺组小鼠双侧“足三里”穴电针干预30分钟。针刺治疗结束后,给予小鼠颈背部皮下注射20ul生理盐水或50ug组胺,观察记录各组小鼠30分钟内的搔抓次数,采用Western Blot技术检测小鼠DRG、下丘脑及海马区STAT5的表达。结果:(1)转录因子Stat5与瘙痒关系皮下注射组胺后,30分钟内Stat5 ffcre小鼠的搔抓次数与Stat5 ff小鼠相比明显降低(P<0.001);皮下注射Compound48/80后,Stat5 ffcre小鼠的搔抓次数与Stat5 ff小鼠相比显著降低(P<0.001);皮下注射氯喹后,30分钟内Stat5 ffcre小鼠的搔抓次数与Stat5 ff小鼠相比显著降低(P<0.001)。(2)针刺止痒与Stat5的关系空白组、生理盐水组、2Hz电针组间小鼠的搔抓次数组间比较无统计学差异(P>0.05);组胺组(模型组)小鼠在给药后0-10 min、10-20 min内搔抓次数分别与空白组、生理盐水组、2Hz电针组相比较明显增多(P<0.01)。模针组小鼠搔抓次数较模型组显著减少(P<0.01),假针刺组小鼠的搔抓次数与组胺组比较无显著性差异(P>0.05)。针刺结束后各组小鼠DRG、下丘脑、海马内STAT5表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.Stat5中枢条件性基因敲除小鼠对急性瘙痒反应明显降低;2.低频电针(2Hz)对急性瘙痒有止痒效果;3.电针止痒效应的发挥可能不通过Stat5的介导。
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