【摘 要】
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目的:研究铅暴露对SH—SY5Y细胞APP、DNMT1基因表达和总甲基化水平的影响方法:1培养SH—SY5Y细胞,并将其暴露于不同浓度的醋酸铅溶液中,用MTT法检测不同剂量的醋酸铅对SH—SY
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目的:研究铅暴露对SH—SY5Y细胞APP、DNMT1基因表达和总甲基化水平的影响方法:1培养SH—SY5Y细胞,并将其暴露于不同浓度的醋酸铅溶液中,用MTT法检测不同剂量的醋酸铅对SH—SY5Y细胞生长曲线的影响。2实时荧光定量PCR检测暴露于不同浓度的醋酸铅溶液中的SH—SY5Y细胞,在分化过程中APP和DNMT1基因的mRNA表达水平。3根据DNA提取试剂盒操作说明提取SH—SY5Y细胞的基因组DNA。然后使用DNA总甲基化检测试剂盒进行DNA总甲基化的检测。结果:1随着培养基中铅浓度的增加,各组细胞MTT值随之减少。醋酸铅浓度为50μmol/l时,铅对SH—SY5Y细胞增值有抑制的作用。2和对照组相比,50μmol/l浓度的铅刺激下,APP mRNA变化倍数为1.09,上调了9%;DNMT1 mRNA变化倍数为0.91,下降了9%。100μmol/l浓度的铅刺激下,APP mRNA变化倍数为1.32,上升了了32%;DNMT1 mRNA变化倍数为0.72,下降了28%。3细胞在50μmol/l和100μmol/l铅中暴露七天,总DNA甲基化水平和对照组相比分别减少至6.8%和10.6%。结论:醋酸铅可能通过改变APP和DNMT1基因的表达来产生神经毒性,其机制可能与改变神经细胞基因的总甲基化水平有关。
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