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目的建立可同时测定大鼠体内羟基酪醇及羟基酪醇对甲苯磺酸酯类前体药物HTS1、HTS2的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检测方法,阐明HTS1,HTS2的体外稳定性、药代动力学特性及组织分布情况。方法1建立能够同时检测HTS1、HTS2溶液样品和HT、HTS1、HTS2生物样品的HPLC、LC-MS/MS检测方法,并依据方法学要求进行验证;2测定HTS1、HTS2的平衡溶解度及正辛醇/磷酸盐缓冲液系统中的油水分配系数;检测HTS1、HTS2在不同pH磷酸盐缓冲溶液中、80%SD大鼠及人血浆中、大鼠及人肝S9孵育体系中的稳定性;3灌胃和尾静脉注射HTS1,HTS2后,采用LC-MS/MS法检测大鼠血浆中不同时间点HTS1、HTS2及活性代谢物HT的浓度,运用WinNonLin药代动力学智能分析软件拟合房室模型,计算药代动力学参数;采用LC-MS/MS法检测灌胃给药后HTS1、HTS2在大鼠各组织中的分布情况。结果1色谱柱为Kinetex C18反相柱（100 mm×2.1 mm,2.6μm粒径）,以甲醇:水（0.1%甲酸）组成的流动相进行梯度洗脱,三重四级杆质谱、电喷雾电离源进行多反应监测（MRM）,HT、HTS1在[M-H]-条件下监测,HTS2在[M+Na]+条件下监测;经验证在设定浓度范围内LC-MS/MS方法线性r>0.99;基质效应、日间日内精密度RSD值在15%以内,准确度在115%以内,提取回收率在78.50%以上;2 HTS1、HTS2的平衡溶解度随pH的升高而增加,水中的平衡溶解度分别为102μg/mL和55μg/mL;HTS1、HTS2的logP值在0.83.4之间;HTS1、HTS2在80%SD大鼠及人血浆中剩余含量无明显变化,在SD大鼠肝S9及人肝S9孵育体系中均可被代谢,反应半衰期分别为HTS1(T1/2=58.7±8.4 min,T1/2=63.0±10.9 min),HTS2(T1/2=154.0±14.8 min,T1/2=171.7±24.8 min);3静脉给药后HTS1、HTS2分别约有16.9%、23.9%转化为其活性代谢物HT,代谢出HT的半衰期(T1/2)分别为1.8±0.2h,4.1±0.2 h;灌胃途径HTS1、HTS2代谢出HT的T1/2分别为1.6±0.1 h,11.3±0.9h,与对照组相比显著延长;HTS1-HT、HTS2-HT的绝对生物利用度分别为64.7%、57.3%,显著提高;灌胃给药后HTS1、HTS2在肝、肾、心、肺、小肠中均有分布,小肠内分布最多,心、肺中分布较少。结论建立了一种简便、准确、灵敏的LC-MS/MS方法并成功应用于HTS1、HTS2大鼠体内药代动力学及组织分布研究,此方法可同时测定HT及其前药HTS1、HTS2;HTS1、HTS2具备前药特性,并有效延长HT体内作用时间,提高HT生物利用度;灌胃给药后HTS1、HTS2在肝、肾、心、肺、小肠组织均有分布,小肠内吸收最多。作为羟基酪醇的酯类前药,HTS1、HTS2可能成为新的有潜力的羟基酪醇前体药物。图34幅;表22个;参108篇。