【摘 要】
:
目的口腔颌面部损伤可导致复杂的软、硬组织缺损,包括血管、皮肤、神经、骨、牙齿等,严重影响患者的生活质量。外泌体的无细胞疗法具有促进组织再生的潜能,并在一定程度上可以实现口腔及颌面部组织的修复和再生。但外泌体存在半衰期短、清除速度快等问题。本实验将分离纯化的外泌体包封在聚乙烯醇/海藻酸钠纳米水凝胶中,研究所制备的材料对皮肤缺损组织修复和再生能力的影响。方法采用超速差速离心法分离并纯化来源于人脐带间充
论文部分内容阅读
目的口腔颌面部损伤可导致复杂的软、硬组织缺损,包括血管、皮肤、神经、骨、牙齿等,严重影响患者的生活质量。外泌体的无细胞疗法具有促进组织再生的潜能,并在一定程度上可以实现口腔及颌面部组织的修复和再生。但外泌体存在半衰期短、清除速度快等问题。本实验将分离纯化的外泌体包封在聚乙烯醇/海藻酸钠纳米水凝胶中,研究所制备的材料对皮肤缺损组织修复和再生能力的影响。方法采用超速差速离心法分离并纯化来源于人脐带间充质干细胞的外泌体。检测外泌体的形态、粒径、表面标志性蛋白及人脐静脉内皮细胞对外泌体的摄取能力。制备聚乙烯醇/海藻酸钠纳米水凝胶。检测水凝胶的生物相容性。将其与外泌体直接混合,制备包封外泌体的聚乙烯醇/海藻酸钠纳米水凝胶,通过傅里叶红外光谱检测、扫描电镜及动态激光散射检测包封外泌体后的水凝胶,及体外缓释性能。采用大鼠建立糖尿病模型,于其背部做直径为15mm的圆形缺损,随机分4组处理:Cont组为空白对照组注射PBS、NH组为注射聚乙烯醇/海藻酸钠纳米水凝胶、exo组为注射外泌体、exo@H为注射包封外泌体的聚乙烯醇/海藻酸钠纳米水凝胶,体外实验分别进行细胞增殖、迁移、血管形成实验,体内分别进行缺损部位大体观察、组织学观察及相关蛋白表达的免疫印迹分析。结果透射电镜结果表明经分离纯化的外泌体形态接近球状,粒径分析直径介于40-150nm,表达肿瘤易感基因101蛋白(TSG101)、染色质修饰蛋白4B(CHMP4B)、溶酶体相关膜蛋白-3(CD63)。Exo@H的吸收峰比其他基团更强,具有更多的活性官能团,exo@H是由平均尺寸为400nm的纳米粒子组成的。傅里叶红外光谱检测结果显示,这些基团的波长没有差异,但是exo@H的吸收峰比其他基团更强,表明exo@H具有更多的活性官能团。体外蛋白质印迹法测定包裹在NH中的外泌体可以持续释放1-2周。Exo@H组对HUVECs的增殖、迁移和血管生成优于Cont、NH、exo组(P<0.05),exo@H组优于exo组(P<0.05);exo和exo@H组处理的伤口中,与NH组相比,伤口大小显著减小;在术后第6、12和18天,exo@H组的伤口区域明显小于Cont、NH、exo组。术后第18天,exo@H组伤口几乎修复到闭合状态,而exo组伤口仍可见。组织学结果表明,与exo和exo@H组相比,Cont组和NH组不能形成较完整的上皮组织;exo组和exo@H组已经完成了再上皮化的过程,exo@H组的上皮比exo组更光滑、规则,伤口周围开始形成毛囊;Cont组和NH组仅出现少量胶原纤维束,且排列疏松、紊乱;与Cont和NH组相比,exo和exo@H组的伤口处有较多的胶原纤维,且其排列有序,exo@H组胶原纤维更粗壮。Western blotting实验结果显示,exo@H组中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、B类Ⅰ型清道夫受体蛋白(SR-B1)、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板-内皮细胞粘附因子(CD31)表达明显高于exo组、NH组(P<0.05)。总ERK1/2的表达在各组之间没有差异。相比于NH组,exo和exo@H两组中p-ERK1/2的表达水平明显更高,并且exo@H组比exo组能更有效地促进ERK1/2的磷酸化(P<0.01)。结论1、聚乙烯醇/海藻酸钠纳米水凝胶包裹外泌体呈现出较好的生物相容性,能够促进人脐静脉内皮细胞的增殖、迁移和血管生成;2、聚乙烯醇/海藻酸钠纳米水凝胶包裹外泌体能够通过VEGF/ERK1/2通路促进新生血管的形成,从而加速糖尿病大鼠皮肤缺损的愈合。
其他文献
目的通过多时相重建前、后冠脉图像质量的对比研究,探讨心率及心动周期等因素对冠脉图像质量影响,重建后不同心率段提高冠脉质量差异。方法选取本院门诊行CTCA成像检查经自动最佳重建时相图像(auto best phase)无法满足诊断要求而进行多时相重建后满足诊断患者92例。按照机器自动生成心动周期(beat)数量分成2组,beat1组、beat2组;按照心率(heart rate,HR)波动范围又分成
习近平总书记将生态文明与国家兴旺、民族命运紧密联系在一起,并从构建“人类命运共同体”的高度阐述了加强生态文明建设的重要性。“习近平生态文明思想”是中国共产党人的理论创新、实践创新和制度创新的成果;是立足于中国的基本国情、顺应于全球的和平发展、放眼于未来的发展、回应人民群众呼声的伟大创举,是推动社会主义事业健康、快速发展和建设“美丽中国”必然选择。大学生是中国特色社会主义事业的建设者和接班人,是实现
经济全球化的深入发展使人类社会互相关联,成为一个命运共同体,经济、安全、环境、文化领域的许多重大问题早已经超越国别的限制,演变为全球性挑战,没有任何一个国家,可以凭借一己之力解决这些问题和挑战。在这样的社会历史条件下,如果世界各国一味追逐自身利益、恶性竞争,只会给人类社会带来灾难性结果。习近平人类命运共同体思想从世界各国协调发展的视角出发,主张尊重不同国家的发展权利,呼吁不同文明之间的交流互鉴,寻
第一部分人脐带间充质干细胞的分离、培养、扩增及生物学特性观察目的建立从人脐带组织中分离间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)的方法,并进行UC-MSCs培养及扩增,进一步观察其生物学特性。方法采用联合酶消化法(混合型胶原酶和胰蛋白酶)分离培养脐带间充质干细胞。用流式细胞仪检测细胞表面标志。诱导UC-MSCs向脂肪细胞、成骨细胞分化
纳米技术与认知增强技术的结合将使人们长久以来拥有更强大脑的愿望得以实现,人们利用纳米认知增强技术在短时间内就能突破自我限制,使认知能力得到大幅度提升。这种改变的确可以给人类带来强大的满足感和幸福感,但同时也会带来更为持久而深刻的社会伦理问题,对此我们必须予以高度重视,努力做到防患未然。文章共分为四个部分。第一部分介绍了选题缘由,研究目的及意义、国内外研究综述,以及研究方法和创新之处。第二部分对纳米
目的探讨尿激酶静脉溶栓治疗对急性轻型脑卒中的有效性及安全性分析及对患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、可溶性血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平影响。方法选取急性轻型脑卒中患者96例,根据是否接受溶栓治疗分为溶栓组(53例)、非溶栓组(43例)。溶栓组予以尿激酶静脉滴入+标准治疗(包括抗血小板、降血脂、改善循环等治疗),非溶栓组予以标准治疗,两组
“百善孝为先”,孝道作为道德之首,是一切善的根本,是中华五千年延续至今的传统美德。党的十八大以来,习近平总书记也曾多次在讲话中强调了中华优秀传统文化的传承与创新等重要思想。本文主要以大学生群体为研究对象,以孝亲观研究为核心内容,采用文献分析、理论联系实际等研究方法,深入解析传统孝亲观教育的价值,对当代大学生孝亲观教育的现实困境进行分析,并提出相应的解决路径。加强新时代大学生孝亲观教育不仅能够让大学
目的Duchenne型肌营养不良(duchenne muscular dystrophy,DMD)是一种进行性致命的X连锁隐性遗传性神经肌肉疾病,主要为男性患者受累。1、分析Duchenne型肌营养不良(DMD)患者长期服用激素对白内障、眼压的影响及白内障、高眼压发生的危险因素。2、杜氏肌营养不良症(DMD)作为严重影响运动能力的遗传性肌病,至今仍没有特效的治疗药物,家庭照料是影响患者生存质量的主
目的糖尿病对眼睛的损害有很多方面,但最常见的眼部并发症是视网膜病变。在全球2.46亿糖尿病患者中,约有三分之一将会患糖尿病视网膜病变的风险,除了损害视力,糖尿病视网膜病变的存在也意味着危及生命的全身血管并发症的风险增加。防治糖尿病视网膜病变的发生和发展,糖尿病视网膜病变新药的研发是首要任务。本文考察不同产地红花质量,探讨红花对抗糖尿病视网膜病变机制,证实红花可以治疗糖尿病视网膜病变。红花结合黄芪制
目的金纳米材料因为其较高的导电性,良好的生物惰性,大的比表面积以及较强的导电性能和X射线吸收系数等特点被广泛关注。近年来,金纳米材料越来越多的被应用于各个领域中,同时金纳米及其复合材料的研究也取得了很大的进步。在本文中,应用电化学还原法制备金纳米粒子,并首次结合金纳米粒子(AuNPs)和新型导电聚合物聚(3,4-乙烯二氧噻吩):聚苯乙烯磺酸盐(PEDOT:PSS)纳米材料,建立了一种超灵敏的信号放