前列腺癌（prostate cancer，PCa）是常见的老年男性泌尿系统疾病，通常就诊时疾病已进展至中晚期，发生骨、肺或肝等转移。肿瘤的侵袭转移是一个复杂的多环节、多步骤过程，既涉及到肿瘤细胞的生物学行为，也与肿瘤间质血管和细胞外基质密切相关。作为征服肿瘤的策略之一，以肿瘤间质血管为靶点的肿瘤转移机制研究和临床治疗成为该领域的热点。前期实验中获得了与高转移性前列腺癌特异性结合的血管内皮细胞表面蛋白拟似肽B04，提示了高转移性前列腺癌可能表达特异性蛋白与血管内皮细胞相互作用进而影响转移。研究此短肽对前列腺癌细胞生物学行为及与血管内皮细胞粘附的影响，可进一步揭示前列腺癌转移机制和提供新的治疗靶点。本实验中研究了短肽B04对PC-3M细胞生物学行为的影响，B04对PC-3M细胞与内皮细胞及Matrigel粘附能力的影响，并对短肽B04进行了生物信息学分析，对其可能受体进行了初步定位。实验方法：通过Western Blot对短肽受体蛋白进行初步定位分析；通过细胞形态学观察、CCK-8和流式细胞术等方法研究B04对PC-3M细胞铺展、增殖及细胞周期的影响；通过细胞粘附实验分析短肽B04对PC-3M细胞与HUVEC及Matrigel的粘附影响；生物信息学方法分析B04拟似的蛋白功能及表达等。实验结果：1.利用Western Blot方法检测了短肽B04受体蛋白在不同转移潜能的前列腺癌细胞系的细胞膜和胞浆中的表达情况,发现B04的受体蛋白特异性表达于PC-3M细胞膜，胞浆中无表达，PC-3细胞无表达；2.对与B04共孵育的PC-3M细胞进行形态学观察，结果发现短肽B04可以有效抑制PC-3M细胞铺展（P＜0.01），且抑制能力随短肽浓度升高而增强；3.肿瘤细胞与内皮细胞及Matrigel粘附实验中发现PC-3M与HUVEC细胞的粘附存在密度依赖性，随着PC-3M细胞密度增加，与HUVEC细胞粘附的PC-3M细胞数明显增加；B04对PC-3M细胞与内皮细胞及Matrigel粘附能力表现出了不同的影响，B04促进PC-3M细胞与HUVEC细胞的粘附（P＜0.05），抑制PC-3M细胞与Matrigel的粘附（P＜0.05），抑制率为45%；4.利用CCK-8法细胞增殖实验显示，B04可以有效抑制PC-3M细胞的增殖（P＜0.05）；流式细胞术检测细胞周期，结果显示与B04共孵育的PC-3M细胞S期比例下降（P＜0.05），G2期比例上升（P＜0.05），提示B04同时抑制了PC-3M细胞的DNA合成和有丝分裂。综上所述，血管内皮表面蛋白拟似肽B04通过与细胞膜上的受体蛋白相互作用抑制了PC-3M细胞的铺展、增殖，对PC-3M细胞与内皮细胞及细胞外基质的粘附能力表现出了不同的作用。生物信息学分析发现B04中的GWT序列存在于多种具有粘附功能的蛋白序列中。