脾切除对不同年龄段腹腔感染大鼠Th1、Th2细胞因子的影响

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目的:研究不同年龄段腹腔感染大鼠在脾切除前后不同时间点Th1 (TNF-α)和Th2(IL-10)细胞因子的表达。方法:健康雌性SD大白鼠120只,按年龄分为A组:幼年组(1月龄)和B组:成年组(12月龄),体重分别约为150g和400g,每组60只,每组又分为脾切组和保脾组,脾切除后饲养2周,再随机从每小组抽取6只,其余大鼠采用盲肠结扎加穿刺法(CLP)复制腹腔感染模型,分别于CLP后3h、6h、12h、24h不同时间点抽取血液,并用酶联免疫吸附(ELISA)法测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素10(IL-10)在血清中的含量,取心、肝、肺、肾、肠作病理形态学检查,用免疫组化技术检测CLP前后肝脏组织中TNF-α、IL-10的表达水平的变化。结果:1、CLP后,脾切组24小时内大鼠的死亡率3.33%,而有脾组无死亡,死亡率0%。2、各组大鼠在CLP后有不同程度腹腔感染,同时心、肺、肝、肾、肠组织也有不同程度的病理改变,其中幼年脾切大鼠最显著。3、各组TNF-α在CLP后3小时都达到高峰,随后缓慢下降,各时间点TNF-α水平都高于CLP前,统计有显著差异(P<0.01)。A组与B组TNF-α水平变化趋势基本一致,比较各时间的TNF-α水平无明显差异(P>O.05),但总体水平可以看出各个时间点A组TNF-α浓度都大于B组。脾切组在CLP后3小时TNF-α水平高于有脾组(P<0.05),6小时两组无差异(P>0.05),但12小时后,脾切组TNF-α水平低于有脾组持续至24小时,有显著统计学差异(P<0.01)。4、各组IL-10水平在CLP后3,6,12小时较CLP前增高(P<0.01),有脾组在24小时时恢复到CLP前, A组与B组在各时间点比较无明显差异(P>O.05)。脾切组在CLP后3小时IL-10水平与有脾组比较无明显差异(P>0.05),6小时后,脾切组IL-10的水平高于有脾组持续至24小时,有统计学差异(P<0.01-0.05)。5、各组肝组织中TNF-α的表达水平较CLP前明显升高(P<0.01),3小时达高峰,而后逐渐降低。A组与B组各时间点肝组织TNF-α的表达水平差别不显著。CLP后3小时,脾切组TNF-α的表达水平较有脾组升高(P<0.05),6小时无差异,但12小时后出现脾切组TNF-α的表达水平明显低于有脾组(P<0.05),24小时后更加明显(P<0.01)。6、各组肝脏组织中IL-10的表达水平在CLP后明显升高,在3小时达到高峰,并逐渐降低,24小时仍高于CLP前(P<O.01),A组与B组IL-10表达水平相比无统计学意义,脾切组与有脾组在CLP后3小时IL-10表达无差异(P>O.05),6小时脾切组IL-10表达水平高于有脾组,CLP 24小时后,脾切组IL-10的表达仍高于有脾组(P<O.01-0.05)。结论:1.不同年龄段腹腔感染大鼠脾切除前后TNF-α、IL-10的变化水平基本一致。2.脾切除导致腹腔感染晚期大鼠体内TNF-α降低及IL-10的升高,使其更易发生免疫抑制。3.脾脏在调节炎症反应过程中扮演着重要角色,脾切除后内毒素攻击时,体内细胞因子调控功能异常,可能是OPSI的发生机制之一。
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