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黄酮类化合物灯盏花素具有较强的清除自由基、抗氧化、抗菌、抗血栓等多种药理作用,本课题组发现其有很好的TGF-β1抑制作用,此作用是否能阻止组织纤维化和抗肿瘤是我们探索的重点。本研究的目的是探讨灯盏花素的抗纤维化和抗肿瘤作用及其可能的作用机制。本文采用MTT法检测灯盏花素体外对大鼠肝星形细胞HSC、T淋巴细胞和K562增殖的影响;采用小鼠CC14肝损伤(纤维化)模型和小鼠BLM肺纤维化模型,评价灯盏花素给药后对肝纤维化及肺纤维化的保护作用,并检测组织抗氧化酶活性(如过氧化物酶、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶)、TGF-β1、TNF-α和MDA含量;采用Lewis肺癌皮下移植肿瘤模型和肺转移瘤模型评价灯盏花素体内单独及联合放疗或化疗对肿瘤的抑制作用,并且对联合放疗和化疗的增效减毒作用进行评价;采用4T1乳腺癌皮下移植肿瘤模型,评价灯盏花素对肿瘤手术切除后复发和转移的预防作用。体外细胞培养显示:灯盏花素1-50μmol/L对体外培养的小鼠脾脏淋巴细胞增殖有明显促进作用,其最佳浓度为5-10μmol/L,对体外培养的HSC细胞形态无显著改变,对乳酸脱氢酶释放及细胞增殖也均无显著影响,但对TGF-β1诱导的HSC细胞增殖有抑制作用,IC50为22.04μmol/L (95%可信限13.94-34.19μmol/L)。灯盏花素100μg/ml对K562细胞生长有一定抑制作用,在10-100μg/ml浓度范围内灯盏花素对小鼠淋巴细胞生长无明显影响,但能增强小鼠淋巴细胞对阿霉素的抵抗,促进阿霉素引起的K562细胞生长抑制。在ELISA凋亡检测和流式细胞凋亡检测中,灯盏花素10或30μg/ml能明显促进阿霉素引起的K562细胞凋亡。在大鼠CC14肝纤维化模型中,大鼠血清ALT和AST分别为571.35U/L和514.52U/L(正常对照为56.73和139.27U/L),分别是正常大鼠的10倍和3.69倍;灯盏花素ig100mg/kg治疗的大鼠血清ALT及AST为218.22U/L和247.81U/L,与未治疗组比较分别降低38.19%和48.16%。灯盏花素(ig100mg/kg)治疗对大鼠肝脏羟哺氨酸、胶原、MDA及TGF-β1的升高均有明显降低作用,并且对POD、CAT和总SOD、Cu-ZnSOD酶活性的降低均有明显的升高作用;同样,在小鼠BLM肺纤维化模型中,灯盏花素(ig100mg/kg)对BLM诱导的小鼠肺脏POD、CAT、总SOD、Cu-ZnSOD酶活性的降低均有明显的升高作用,对血清中羟哺氨酸、胶原、MDA和肺组织中TGF-β水平的升高也有明显的降低作用。在Lewis肺癌皮下移植瘤和肺转移肿瘤模型中灯盏花素单独使用具有良好的抗肿瘤和肿瘤转移抑制作用;与放疗或化疗联合使用不但能够产生协同抗肿瘤作用,而且能够抑制甚至消除放疗或化疗所产生的造血系统的损害;既可以延长荷瘤小鼠的存活时间,又不影响荷瘤小鼠的状态和体重。在4T1乳腺癌皮下移植瘤模型中,手术切除后对照组肿瘤复发率和转移率为50%和70%,灯盏花素(ig200mg/kg)治疗的小鼠手术切除后肿瘤复发率和转移率分别为20%和20%。机制研究表明:灯盏花素体外对ConA诱导的小鼠脾脏细胞增殖有增强作用,能抑制TGF-β1和IL-4,促进IFN-γ和IL-2分泌;灯盏花素能促进阿霉素引起的K562细胞生长抑制、细胞色素C释放、caspase-8和caspase-3激活,上调其p53/bcl-2表达比率,增加细胞凋亡。综上所述,灯盏花素有确切的抗组织纤维化和抗肿瘤作用,与放疗和化疗有良好的协同作用,并能抑制放疗和化疗所引起的毒副作用,其机制是抑制TGF-β1从而解除肿瘤的免疫逃逸和激活肿瘤细胞凋亡通路实现的。