【摘 要】
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目的:探讨大鼠C6胶质瘤细胞中GDNF基因高转录与其启动子区组蛋白乙酰化修饰的关系。方法:应用RT-PCR、Real-time PCR和ChIP-PCR技术分别检测大鼠正常星形胶质细胞和C6胶质瘤细
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目的:探讨大鼠C6胶质瘤细胞中GDNF基因高转录与其启动子区组蛋白乙酰化修饰的关系。方法:应用RT-PCR、Real-time PCR和ChIP-PCR技术分别检测大鼠正常星形胶质细胞和C6胶质瘤细胞中GDNF基因mRNA的表达水平以及其启动子Ⅰ区和Ⅱ区组蛋白H3K9的乙酰化程度;利用Real-time PCR和ChIP-PCR技术,检测不同浓度的组蛋白乙酰基转移酶抑制剂姜黄素(Curcumin)或去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)处理对C6胶质瘤细胞中GDNF基因mRNA表达以及其启动子Ⅰ区和Ⅱ区组蛋白H3K9的乙酰化的影响。结果:较之正常星形胶质细胞,C6胶质瘤细胞中GDNF基因mRNA的表达量极显著增高(p<0.01),并且其启动子Ⅰ区和Ⅱ区组蛋白H3K9的乙酰化水平也显著升高(P<0.05)。C6胶质瘤细胞经Curcumin处理24h后,GDNF基因mRNA的表达量随药物浓度的升高而降低,且100μM作用浓度时其表达量下降了74.17%(P<0.001);相反,TSA处理后GDNF基因mRNA的表达量呈上升趋势,且200nM组其表达量约上升145.35%(P<0.05)。同时,GDNF基因启动子Ⅱ区组蛋白H3K9的乙酰化修饰水平对Curcumin或TSA的作用敏感,其乙酰化的变化趋势与转录水平变化趋势一致。结论:在胶质瘤细胞中,GDNF基因启动子Ⅰ区和Ⅱ区组蛋白H3K9乙酰化水平显著增高;GDNF基因启动子Ⅱ区组蛋白H3K9高乙酰化可能是该基因异常高转录的原因之一。
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