目的:胃癌是消化道最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁着我国人民的生命健康,其死亡率和发病率在世界范围内也位居前列。因此,深入研究胃癌发生、发展过程,阐明其分子病理机制至关重要。然而,一方面,缺乏理想且有效的研究模型是限制胃癌研究的重要因素。但随着类器官技术的兴起与发展,类器官已经成为胃癌研究重要的体外模型。另一方面,能量代谢与恶性肿瘤的发生密切相关,瓦博格效应揭露了细胞恶性转化后最具代表性的异常代谢方式,即有氧条件下,肿瘤细胞仍通过无氧糖酵解的方式作为获取能量的主要途径。AMPK与m TORC信号通路是细胞最重要的代谢调控中枢,二者互相拮抗,调节着人体能量稳态。一旦二者之间的动态平衡被打破,将破坏细胞基因组的稳定进而导致细胞发生恶性转化。因此,我们建立了多种胃组织类器官的体外研究平台,以期进一步探究能量代谢异常与胃组织类器官生长分化的关系,深入寻找能量代谢异常与胃细胞发育的相关机制,为胃癌发生提供新的证据。材料与方法:构建多种胃组织类器官研究模型,其中,小鼠胃黏膜类器官来源于维通利华（北京）公司购买的野生型小鼠,人胃黏膜类器官和人胃癌腹水类器官所用组织标本均来源于2019年至2021年在中国医科大学附属第一医院胃肠肿瘤外科就诊的胃癌患者,本研究中所有患者均已签署知情同意书并获得中国医科大学附属第一医院伦理委员会的批准。基于L-WRN细胞自行制备WRN条件培养基;应用H＆E染色,评估类器官是否很好地保持了来源组织特性;利用m TORC1抑制剂雷帕霉素和AMPK激活剂二甲双胍分别对小鼠胃黏膜类器官进行处理,观察代谢异常对小鼠胃黏膜类器官生长的影响;利用m TORC1抑制剂雷帕霉素对胃癌腹水类器官进行处理,观察代谢异常对胃癌腹水类器官生长及分化的影响;利用免疫荧光检测TXNIP与逆生标志物的表达情况;基于小鼠胃黏膜类器官制作基因芯片,筛选差异基因后进行基因富集分析和基因集变异分析,研究代谢异常对小鼠胃黏膜类器官生长分化及代谢的影响。结果:成功构建了不同胃组织类器官的体外研究平台,包括小鼠胃黏膜类器官、人胃黏膜类器官、人胃癌腹水类器官;成功利用L-WRN细胞自行制备适用于类器官培养的WRN条件培养基;基于小鼠胃黏膜类器官模型,发现m TORC1抑制剂雷帕霉素可使小鼠胃黏膜类器官体积明显减小。AMPK激活剂二甲双胍也可使小鼠胃黏膜类器官体积明显减小。小鼠胃黏膜类器官基因芯片分析结果表明代谢异常可能影响小鼠胃黏膜类器官的分化,降低多种代谢水平。此外,雷帕霉素还可使人胃癌腹水类器官的体积明显减小。免疫荧光结果表明TXNIP与逆生标志物存在共表达,发现TXNIP在胃癌腹水类器官中的重要调控作用。结论:成功构建了多种胃组织类器官的体外培养体系,并且类器官能很好地保留来源组织的特性,是研究疾病发生发展的理想体外模型。L-WRN工具细胞生产的含有Wnt3a、R-spondin-1、Noggin等三种细胞因子的WRN条件培养基可以替代体外商品化的细胞因子,甚至类器官培养效果更好。m TORC1抑制可显著抑制不同胃组织类器官生长,并可能抑制胃组织类器官分化。AMPK激活可显著抑制不同胃组织类器官生长,还可能促进胃组织类器官分化。TXNIP参与逆生第二阶段和第三阶段的调控,在胃癌发生及腹膜转移过程中可能具有重要作用。