论文部分内容阅读
药物成瘾可被定义为“一种不顾后果强迫性追求用药的行为”，已经成为严重危害人类健康的疾病之一，每年因成瘾死亡的人数众多，给社会带来巨大的损失，随着社会经济的发展，该严重的社会问题将显得尤为突出。可卡因是最常见的成瘾药物之一，它通过抑制三种单胺类转运体：多巴胺（dopamine，DA）、5-羟色胺和去甲肾上腺素能转运体，增强突触间的单胺类传递，其中对多巴胺转运体的抑制作用最强。大量的研究表明，中脑边缘系统内的神经回路与药物成瘾密切相关，其中伏隔核（NAc）及其来自腹侧背盖区（VTA）的多巴胺能神经纤维是研究的热点，其他脑区如杏仁核和额叶皮层（PFC）等边缘系统结构参与了神经回路的形成。DA和谷氨酸（glutamate，Glu）是该回路中最重要的两种神经递质，在成瘾的发生和发展过程中发挥重要作用。药物成瘾的确切机制至今还不十分清楚，目前也无理想药物治疗可卡因及其他药物成瘾。因此，对药物成瘾机制进行深入研究，能够为开拓新一代安全、有效的治疗药物提供有益的靶标。 ATP敏感性钾通道(ATP-sensitive possium channel，KATP)是一类直接偶联细胞代谢活动与电活动的特殊钾离子通道，继1983年Noma在心脏首次发现KATP后，又先后在许多组织，包括血管平滑肌、胰腺β细胞和神经元等发现该通道，它一种是弱的内向整流K+选择性通道。分子生物学和电生理学研究证实，KATP是一类由ABC（ATP-binding cassette，ABC）结合蛋白家族成员磺酰脲类受体（SUR）与内向整流钾通道（inwardly rectified potassium Channel，Kir）组成的异源性八聚体。目前已经克隆了2个Kir家族成员：Kir6.1和Kir6.2，以及2个SUR异构体：SUR1和SUR2。Kir是ATP的结合位点，决定通道的电导性，而SUR是磺脲类、钾通道开放剂和二磷酸核苷酸 南京医科大学硕士学位论文（NDP户的结合部位。K。P在中枢神经系统不同区域广泛存在，可能发挥重要的神经保护作用。众所周知，Gill和 DA在可卡因成痛过程中占据重要地位。K。，可以调节 DA和o 的释放，K。，激动剂在理论上有助于治疗可卡因成穗，但关于KATP通道和可卡因成痛相关性的研究至今未见报道。 埃他卡林（iptakalim hydrochloride，IP）k一个由我国学者自行设计和合成的脂肪仲胺类小分子新化合物，药理学、电生理学以及生化学研究和受体结合试验Jb表明＊T具有K。，开放剂（。，oh删elopeners，KCOs）的特征。令人兴奋的是，IPT是目前唯一能够透过血脑屏障的选择性KCOS，故可以通过系统给药方式进行研究。本实验室已有的研究工作表明，IPT参与调节中枢o 和 DA的代谢。本文研究工作从整体一递质一分子水平等多层次研究 IPT的作用，阐明K。。通道与可卡因成痛的相关性，为IPT发展为治疗可卡因成痛的药物积累学术与实验基础。一、IPT对忘、馒性可卡囚引起的小么自主活劝以及大鼠脑内DA和＊山合量变化的影响1、IPT对急性可卡国引起的小鼠行为活劝变化的形响目 的：在整体水平研究IPT对可卡因的作用的影响。方法与实砍分缸：纯种昆明小鼠，雌雄各半，随机分为4组：1）对照组：腹腔注射生理盐水20ml从g；2)可卡因处理组：腹腔注射可卡因30mg从g3)1＊T单独处理组：腹腔注射1＊TO．乃二旮k巳4)1＊T干预组：腹腔注射1＊TO．乃＊旮吨，5加n后再次腹腔注射可卡因30m旮吨。利用自主活动箱测定小鼠给药前后的活动次数。结 果：急性给予可卡因ollg／kZ，叫显著增加小鼠的自主活动（P＜0＊ 1，与对月组相上）；单独给予 IPTo．75rug从g，lp)对小鼠的自主活动没有影响；预先给子 IPTN．乃二卓吨，呐不影响急性可卡因引起的小鼠活动次数增加。结 沦：在整体水平 IPT不影响急性给予可卡因引起的小鼠自主活动增加。 〕 南京医科大学顾士学位论文入IPT对志性可卡因引起的大鼠脑内DA和GItl令量变化的形响 目 的：研究IPT对急性可卡因作用的大鼠伏隔核、纹状体和额叶皮层的DA和＊ 含量变化的影响。 方法与实验分组：雄性SD大鼠，随机分为4组：1)对照组。腹腔注射生理盐水2二l吨Z2)可卡因处理组：腹腔注射可卡因扣mg／kg ； 3)IPT 0．75 mg／kg干预组：腹腔注射 IPT 0＊5 mg／kg s min后再次腹腔注射可卡因 30 mg从g； 4)IvT．s mg从g ＋预组：腹腔注射 IPT．5 mg从g，5 min后再次腹腔注射可卡因 30 mg从g。最后一次给药后 30min处死动物，取出伏隔核、纹状体和额叶皮层，称重，匀浆，AI。O。吸附法提取 DA，HCIO。酸化沉淀法提取0，利用高效液相色谱（HPLC）结合电化学检测和荧光检测手段测定各脑区 DA和Gill的含量。 sl： 1)急性给予可卡因 门 0 mgilig，…显著增加大鼠纹状体和伏隔核的 DA含量，I匕对照组分另IJ提高了 23．6o和 25．lO(P＜0