【摘 要】
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花青素作为一种类黄酮类物质,是植物体内广泛存在的水溶性的天然色素,其分布在花、叶和果实中从而使植物具有五彩缤纷的颜色。花青素还可以帮助植物吸引昆虫传播授粉,抵御紫外线的照射、冷害、干旱等侵害。多数研究表明食用含有花青素的食物能够降低心血管和肿瘤等方面的疾病。茄子（Solanum melongena L.）作为世界上大面积种植的蔬菜,其紫色果皮中含有大量的花青素。广东省农业科学院蔬菜研究所通过前期的
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花青素作为一种类黄酮类物质,是植物体内广泛存在的水溶性的天然色素,其分布在花、叶和果实中从而使植物具有五彩缤纷的颜色。花青素还可以帮助植物吸引昆虫传播授粉,抵御紫外线的照射、冷害、干旱等侵害。多数研究表明食用含有花青素的食物能够降低心血管和肿瘤等方面的疾病。茄子（Solanum melongena L.）作为世界上大面积种植的蔬菜,其紫色果皮中含有大量的花青素。广东省农业科学院蔬菜研究所通过前期的研究将控制茄子果色的上位性基因P定位在8号染色体上。因此本论文拟在前期的研究基础上,开发与P基因紧密连锁的分子标记;在紧密关联区域内进行基因功能注释,挖掘P基因候选基因,并利用实时定量PCR对候选基因Sm ANS进行表达分析,通过基因克隆分析父母本Sm ANS结构的差异,利用VIGS对候选基因Sm ANS的功能进行验证,从而探究候选基因Sm ANS在茄子果色上位性遗传背景下调控花青素合成的作用机制。本研究获得主要结果如下:1.通过对父本和母本的基因组重测序结果设计引物,利用父本、母本和F1进行引物筛选,在F2中进行验证,筛选出5531In Del分子标记,其具有长度为50bp和35bp两处特异插入/缺失（In Del）片段,该标记距离目标基因P的遗传距离为0.5c M。2.利用实时荧光定量PCR技术,对候选基因Sm ANS进行表达分析发现,Sm ANS主要在茄子的花和果皮中大量表达,母本白色幼果皮中其表达量要显著大于紫色果皮的F1,父本白色花中表达量显著高于紫色花的F1。3.通过基因克隆获得父本和母本的Sm ANS基因DNA全长序列和m RNA序列,结果表明Sm ANS基因DNA全长为3129bp,包含2个外显子和1个内含子,ORF序列长为1242bp。父本共编码413个氨基酸,推测蛋白质分子量为46.77KD,具有三个保守结构域。母本在+101个碱基发生突变由T变为A从而导致终止密码子提前。4.通过对候选基因Sm ANS进行VIGS验证,结果表明两个不同的载体p TRV2-Sm ANS-1和p TRV2-Sm ANS-2均能有效的抑制花青素的合成从而使果皮颜色变白。对不同载体处理的材料进行实时荧光定量PCR表达分析,结果表明处理材料中Sm ANS相对表达量均显著低于正常果和阴性对照,p TRV2-Sm ANS-1载体在前期的抑制效果要高于p TRV2-Sm ANS-2。
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