亚精胺对小鼠胶原诱导性关节炎的治疗作用及其机制研究

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目的:探究亚精胺(spermidine,SPD)对小鼠胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)的治疗效果及作用机制,为类风湿性关节炎的治疗提供新思路。方法雄性6周龄C57BL/6小鼠25只,随机选取5只作为正常对照组,其他小鼠均进行CIA模型建立。初次免疫后第27天,将造模成功的小鼠随机分为四组:CIA对照组、SPD-H组、SPD-M组和SPD-L组,每组5只,每日分别予以生理盐水、50mg/kg SPD、10mg/kg SPD、2mg/kg SPD腹腔注射治疗,持续21天。定期测量小鼠左足垫厚度,并行关节炎评分。初次免疫后第49天计算治疗前后足爪肿胀变化度,收集各组小鼠的血液及踝关节标本。通过酶联免疫吸附法检测小鼠血清中白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和IL-10的含量;踝关节进行苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)及免疫组化染色,分别进行滑膜病理学评分、踝关节滑膜组织中F4/80、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和CD206的表达观察。结果:1.不同浓度亚精胺治疗的CIA小鼠足垫厚度及关节炎评分均呈下降趋势,其中SPD-H组下降最明显。2.三种浓度的亚精胺治疗均可不同程度地减轻小鼠足爪肿胀程度,SPD-H组小鼠关节炎评分最先下降,SPD-L组小鼠足爪肿胀度较CIA对照组显著减轻(P<0.05)。3.CIA对照组小鼠血清IL-6水平明显高于SPD-H组、SPD-L组和正常对照组(P<0.05),TNF-α水平显著高于SPD-H组、SPD-M组、SPD-L组和正常对照组(P<0.01),而其IL-10水平显著低于SPD-H组、SPD-L组和正常对照组(P<0.05)。4.CIA对照组与正常对照组相比,存在明显的滑膜细胞增生、淋巴细胞浸润和纤维素样坏死(P<0.01);SPD-H组淋巴细胞浸润显著低于CIA对照组(P<0.05);不同浓度亚精胺治疗组的纤维素样坏死评分均低于CIA对照组(P<0.05)。5.亚精胺以剂量依赖性方式抑制CIA小鼠踝关节滑膜组织巨噬细胞的iNOS表达。结论:1.亚精胺可有效改善CIA小鼠的关节肿胀,降低关节炎评分,其中50mg/kg亚精胺具有更好的疗效。2.亚精胺可明显减轻CIA小鼠滑膜细胞增生、炎症细胞浸润和纤维素样坏死,具有较好的抗炎作用。3.亚精胺能降低CIA小鼠血清中IL-6和TNF-α水平,增加IL-10水平,抑制滑膜组织中M1型巨噬细胞极化,提示亚精胺的抗炎作用可能与巨噬细胞极化有关。
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