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背景: 心力衰竭(Heart Failure,HF)也称充血性心力衰竭,是由于心脏器质性或功能性疾病损害心室充盈和射血能力而引起的一组临床综合征;是绝大多数心血管疾病的最终归宿,也是最主要的死亡原因。引起心衰的基础心脏病的构成主要是冠心病、高血压、风心病。心竭已成为世界范围内的主要公共卫生问题,流行病学资料显示,其患病率高、致残率高、死亡率高、医疗费用更高,且发病率随年龄增长而增加,严重影响着患者的生活质量和寿命,给家庭、社会造成了沉重的医疗负担,因此心衰的防治一直是现代医学界中的研究热点。 代谢组学研究方法与中医药治疗疾病的整体观念相一致,在中医证候及临床研究研究中取得了一定成果,有助于揭示中医证候的本质,其整体而系统的研究观点有可能会成为现代中医研究的桥梁及切人点,将进一步推动中医药事业现代化的进程。 目的: 探讨应用高效液相色谱( High performance Liquid Chromatography,HPLC)法研究心衰心阳虚证患者血浆中氨基酸(缬氨酸(Valine,Val)、苯丙氨酸(Phenylalanine,Phe)、异亮氨酸(Isoleucine,Ile)、亮氨酸(Leucine,Leu))的图谱特点,以及此证型患者的B-型尿钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)指标水平的特点,为心衰心阳虚证患者的中医证候量化的研究提供客观数据支持。 方法: 本研究为横断面研究,自2010年2月到2010年10月,从广东省中医院急诊、留观、综合病区选取67例病人,其中心衰40例,非心衰27例。纳入后行相关理化检查,并留取患者血液样本并用HPLC法得出受试者血浆氨基酸(缬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸)的代谢指纹图谱,观察其特点,并寻找心衰组与非心衰组代谢图谱指标的相关性,各组的氨基酸代谢指纹图谱指标、BNP与Boston积分、心阳虚证候积分的相关性。 结果: 纳入的67例研究病例中,有1名患者症状较重,处于昏迷状态,无法对其进行中医证候评分,有1名患者血浆氨基酸数据丢失,无法进行氨基酸含量测定。共观察心衰心阳虚患者39例(男15例,女24例),非心衰患者27例(男14例,女13例),男女间各项一般资料无统计显著性差异。 心阳虚证候积分随BNP水平增加而增加且呈线性相关,回归方程为Y=11.623+0.002XBNP,回归系数检验(P<0.001),具有统计学意义。 在固定的色谱条件下以HPLC法检测67例患者的血浆,得出氨基酸代谢指纹图谱。缬氨酸(Val)、苯丙氨酸(Phe)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)在20min内得到分离。血浆中的内源性物质不干扰测定。分别以浓度为自变量,心阳虚证候积分为应变量作散点图,可见心阳虚证积分与缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸浓度变化没有明显趋势关系,只有与苯丙氨酸呈正相关趋势,构成线性关系,回归方程为Y=10215+7.577XPhe,回归系数检验(P<0.05),具有统计学意义,余3种氨基酸与心阳虚证积分的线性关系在统计学上不成立。 结论: 基于高效液相色谱法测定氨基酸的代谢指纹图谱,具有选择性高、分析速度快和灵敏度高等优点。4种氨基酸中,苯丙氨酸与心阳虚证候积分存在明确的直线关系,可作为评价心衰心阳虚证的一个参考指标;在此研究基础上,氨基酸代谢指纹图谱有望可用于找出心衰心阳虚患者的证候特点。