目的：建立阿尔茨海默病细胞模型，研究维药琐琐葡萄总三萜（VTT）、总黄酮（VTF）、多糖（VTP）、齐墩果酸（OA）及大花罗布麻槲皮素（Q1）、槲皮素三氧葡萄糖苷（Q2）和槲皮素三氧槐糖苷（Q3）的神经保护作用，筛选出作用较强的生物活性物质探讨其作用机制，为开发防治AD的民族新药提供实验依据。　　方法：（1）细胞毒性试验确定各组分有效且无毒的作用浓度；（2）Aβ25-35作用于体外培养PC12细胞建立AD细胞模型，检测细胞存活率、细胞凋亡率，确定Aβ25-35作用浓度和时间；（3）琐琐葡萄、大花罗布麻提取物干预细胞模型，从细胞形态结构、存活率、乳酸脱氢酶（LDH）活力的变化确定神经保护作用，并筛选保护作用较强的生物活性物质；（4）通过测定细胞超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）水平，观察Aβ25-35作用下PC12细胞自由基代谢的改变，研究琐琐葡萄、大花罗布麻提取物对细胞氧化应激的影响；（5）从细胞凋亡、细胞超微结构的改变，观察各组药物对Aβ25-35作用下PC12细胞凋亡的保护作用；实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因NF-κB P65、Bax、Bcl-2mRNA表达；蛋白质免疫印迹法研究NF-κB P65、Bax、Bcl-2蛋白表达，研究琐琐葡萄、大花罗布麻提取物对细胞凋亡的保护作用机制；（6）从APPmRNA及其蛋白表达变化，探讨琐琐葡萄、大花罗布麻提取物对 PC12细胞的保护作用。　　结果：（1）通过细胞毒性和活性试验结果确定OA、VTT、VTP、VTF的作用浓度20、40、80μg/ml，Q1、Q2、Q3的作用浓度5、20、80μg/ml；（2）终浓度20μmol/L的Aβ25-35诱导PC12细胞24小时，与对照组比较，细胞数量明显减少，部分细胞脱落，细胞间连接松散，表明细胞受到Aβ25-35毒性作用，细胞活性下降，细胞膜受到损伤，LDH含量增加，细胞凋亡率上升（P＜0.05），AD细胞模型建立；（3）OA、VTT、VTP、VTF、Q1、Q2、Q3、阳性对照 VitE干预结果显示，与模型组比较，各实验组细胞贴壁良好，形态正常有突起，受损程度减轻，细胞存活率均有明显增加，LDH含量明显降低（P＜0.05），且具有剂量相关性，比较琐琐葡萄提取物的保护作用，OA、VTP作用较强，大花罗布麻提取的Q1保护作用较强，筛选出 OA、VTP、Q1，进行作用机制研究；（4）Aβ25-35作用于细胞，与对照组比较，模型组SOD活性明显降低，MDA含量明显增加，NO、NOS、iNOS的含量明显增加，有显著性差异（P＜0.01），细胞受到氧化损伤，VTP、OA、Q1和VitE处理的细胞，SOD活性比模型组增加，MDA的水平降低，NO、NOS、iNOS的含量明显减少，具有显著性差异（P＜0.01）；（5）电子显微镜下观察细胞超微结构，对照组PC12细胞结构正常，核圆，核仁大而明显，外周绒毛密集；模型组加入Aβ25-35后，细胞呈不规则形，外周绒毛少，突起变宽，粗面内质网高度扩张，胞质内细胞器肿胀，有空泡形成，核内异染色质增多，凝聚成团块状，核仁消失，呈现细胞凋亡初期形态改变；OA、VTP、Q1的高剂量实验组及VitE组，损伤细胞明显减少，细胞形态趋于正常；对照组罕见凋亡细胞，模型组凋亡细胞显著高于对照组（P＜0.01）；与模型组比较，VTP、OA、Q1、VitE实验组凋亡细胞数目减少，差异有统计学意义（P＜0.05）；（6）实时荧光定量PCR定量分析显示，与对照组比较，模型组Bcl-2 mRNA表达降低，Bax mRNA和NF-κB P65 mRNA表达显著增加（P＜0.01）；与模型组比较，OA、VTP、Q1、VitE实验组Bcl-2mRNA表达增加，BaxmRNA、NF-κB P65表达减少（P＜0.05）；（7） Western blot结果显示，模型组Bcl-2的蛋白表达减少、Bax和NF-κB P65的蛋白表达增多，OA、VTP、Q1、VitE实验组Bcl-2表达较模型组增加，Bax蛋白表达减少；VTP、VitE、Q1低剂量组、OA低和中剂量组NF-κB P65蛋白表达较模型组减少，而OA高剂量组、Q1中和高剂量组NF-κB P65表达与模型组无差异；（8）模型组APP mRNA、APP蛋白表达升高，与模型组比较，VTP、OA、Q1、VitE干预降低APPmRNA、APP蛋白表达。　　结论：（1）终浓度20μmol/L的Aβ25-35诱导PC12细胞24小时，建立AD细胞模型；（2）VTT、VTP、VTF、OA和Q1、Q2、Q3干预AD细胞模型后，细胞受损程度减轻，细胞存活率明显增加，LDH漏出量明显降低，且具有剂量相关性，表明可以减轻 Aβ25-35诱导的神经细胞毒性，具有神经保护作用，其中VTP、OA、Q1保护作用较强；（3）OA、VTP、Q1干预AD细胞模型，能够通过增加SOD活性、降低MDA含量、减少NO、NOS、iNOS的含量，减轻自由基对细胞膜脂质发生过氧化损伤；（4）Aβ25-35诱导 PC12细胞凋亡，VTP、OA、Q1干预AD细胞模型后，上调Bcl-2mRNA及其蛋白的表达，下调Bax和NF-κB P65 mRNA及其蛋白的表达，抑制细胞凋亡，说明VTP、OA、Q1通过抗凋亡途径减轻神经细胞损伤；（5）VTP、OA、Q1通过抑制APPmRNA、APP蛋白的表达，减轻Aβ神经毒性造成的细胞损伤。综上所述，琐琐葡萄中提取的OA、VTP，大花罗布麻提取的Q1，对Aβ25-35诱导的PC12细胞氧化损伤和凋亡具有明显的保护作用，VTP、OA、Q1通过抗氧化应激、抗凋亡、减少Aβ聚集等作用机制减轻PC12细胞损伤作用。将来增加其他药理实验和动物模型研究基础上，可以将VTP、OA、Q1用于AD的预防和治疗。